第一部分Schwann细胞体外纯化培养【目的】探索一种有效的Schwann细胞纯化培养方法,为今后体外获取高纯度高活性的Schwann细胞视网膜下移植治疗视网膜变性疾病奠定实验基础。【方法】采用改进的坐骨神经组织块反复种植方法分离纯化Schwann细胞。相差显微镜形态学观察、Schwann细胞胶质特异性标志蛋白S-100免疫细胞化学染色进行细胞纯度鉴定。【结果】形态学连续观察及S-100间接免疫荧光、免疫酶染色显示Schwann细胞的纯度达95%。【结论】本实验研究的Schwann细胞纯化培养方法所获细胞纯度高、数量多,可用于视网膜变性疾病的治疗研究。第二部分自体Schwann细胞视网膜下移植【目的】建立新西兰白兔视网膜下移植的实验模型,观察自体Schwann细胞在视网膜下腔短期存活状态。【方法】Schwann细胞分别取自8只新西兰白兔,纯化培养后制成细胞悬液;采用外路法在8只右眼中进行自体Schwann细胞视网膜下腔移植,左眼均为对照眼不施加任何干预因素;观察随访6周即对术眼作组织病理学检查。【结果】自体成功移植4只兔眼,组织学检查显示Schwann细胞在视网膜下腔存活,未发现淋巴细胞和巨噬细胞浸润,移植区周围视网膜结构无明显受损。