【摘 要】
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淀粉占稻米干重的~90%。直链淀粉含量是决定稻米品质的主要因素,由Wx编码的GBSS蛋白合成。水稻暗胚乳突变体因其直链淀粉含量低而广泛应用于品质育种改良及淀粉生物合成机理的研
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淀粉占稻米干重的~90%。直链淀粉含量是决定稻米品质的主要因素,由Wx编码的GBSS蛋白合成。水稻暗胚乳突变体因其直链淀粉含量低而广泛应用于品质育种改良及淀粉生物合成机理的研究。
我们通过对dul标记基因系k1704和秀水11经10余次的回交获得了dul-秀水11及其野生型秀水11用于本文的研究。dul表现直链淀粉含量低、淀粉粒趋小,中等链长和短链的支链淀粉比例增加,粒重减小,碱消值降低,胶稠度增加,籽粒呈云雾状但碘液染色时却呈篮黑色,dul所具有的这些表型特征表明其淀粉合成发生了变化。为理解水稻籽粒淀粉合成机制,我们通过图位克隆的方法分离了Dul基因,序列分析发现该基因G1742→A1742的替换导致氨基酸的非同义置换而影响了Dul蛋白的功能,功能互补试验确证了我们克降的Dul基因。Dul基因编码一个Prpl蛋白,与裂殖酵母的Prplp/Zerlp蛋白和人类的U5-102kD蛋白具有较高的同源性,Dul具有Prpl蛋白的N-端高度保守的结构域和在C-端的19个重复的特征性TPR结构域。通过水稻全基因组的BLAST分析发现,在第1染色体上有与Dul高度同源的DulL,但经进化分析发现水稻Dul蛋白与玉米和大麦的Prpl蛋白在进化关系要比水稻Dul蛋白与其同源蛋白DulL更接近。表达分析发现,Dul的表达以在淀粉合成组织中为主,Dul通过特异性影响Wxbpre-mRNA的剪接及其它淀粉合成基因的表达进而调控淀粉的生物合成。通过对dulwx双突变体的分析发现,Dul上位性调控Wxb。
我们对Dul基因的成功克隆、表达分析以及作用机理的初步研究,将有助于阐明控制水稻籽粒淀粉合成的分子机理。通过转基因技术调控Dul基因的表达有望改善稻米品质。
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