曲妥珠单抗对HER2高表达胃癌细胞株的放疗增敏作用

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目的:研究曲妥珠单抗对HER2高表达人胃癌细胞NCI-N87的放疗增敏作用。方法:应用免疫组化法检测HER2蛋白在胃癌NCI-N87细胞中的表达;荧光免疫杂交法(FISH)检测HER2基因在NCI-N87细胞中的扩增情况;CCK8法筛选曲妥珠单抗杀伤NCI-N87细胞的浓度,一般选取<20%的抑制浓度(20%inhibition concentration,<IC20);根据试验中是否加用曲妥珠单抗分为两组,即对照组与加药组,两组分别给予不同剂量射线的照射(0、1、2、4、6、8Gy),利用克隆形成实验计算胃癌细胞存活率,拟合细胞存活曲线,计算放射的生物学参数;分为空白对照组、药物组、外照射组(2Gy外照射)、联合组(曲妥珠单抗+2Gy外照射),以流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:免疫组化法测得在胃癌NCI-N87细胞中HER2蛋白的表达主要分布在细胞膜,为棕褐色颗粒状,NCI-N87为HER2蛋白2+。荧光免疫杂交法检测NCI-N87细胞HER2/CEP17>2,存在HER2基因扩增。CCK8法筛选的曲妥珠单抗放疗增敏浓度为10ug/ml。加药组Do、Dq、N、SF2均小于对照组,NCI-N87胃癌细胞在曲妥珠单抗10ug/ml剂量下增敏比(SER)为1.2453。曲妥珠单抗或照射组均可增加凋亡率,尤以联合组凋亡率最高(P<0.05)。结论:曲妥珠单抗可提高HER2高表达人胃癌细胞的放疗敏感性,并促进凋亡。曲妥珠单抗有望成为HER2高表达胃癌的放疗增敏剂。
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