Rbm38新磷酸化位点的鉴定及其功能初步研究

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癌症是威胁全球人类生命健康的常见疾病,如何预防和有效治疗癌症是当下的研究热点。Rbm38(RNA-binding motif protein 38)是一个重要的癌症相关的RNA结合蛋白,它能参与包括p53家族在内的许多癌症基因的转录后调控,并对许多癌细胞的增殖衰老起到关键的调控作用。在我们的研究之中,我们发现了Rbm38存在两个新的磷酸化位点:第X位的丝氨酸(SerX),和第Y位的苏氨酸(ThrY)。为了研究SerX的生物学功能,我们设计了针对该位点的磷酸化抗体。我们的抗体检测到Rbm38在SerX磷酸化后可以形成二聚体。我们通过对蛋白互作质谱鉴定的分析找到并验证了Rbm38的SerX的上游磷酸化激酶:A-Raf。它是Raf(rapidly accelerated fibrosarcoma)家族中的成员,参与MAPK(mitogen-activated protein kinase)信号通路,也是一个癌症相关蛋白。我们还发现金属离子Zn2+能促进Rbm38 SerX的磷酸化以及二聚化,但是体外实验表明在A-Raf存在的时候,不依靠Zn2+,Rbm38也能形成二聚体。我们发现二聚化的Rbm38主要分布在细胞核内,而其单体分布在细胞质内。我们发现核运输蛋白Cse1l参与二聚体Rbm38在核质间的运输。此外,我们发现DNA损伤激活Rbm38 SerX磷酸化,导致其以二聚化形式在细胞核内聚集。因此,我们推测SerX磷酸化的Rbm38进入细胞核后,可以参与DNA损伤的直接修复或相关基因的调控。我们已成功构建小鼠品系,将为今后进一步从机体水平揭示Rbm38磷酸化的功能提供帮助。
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