产气荚膜梭菌通过其产生的外毒素能引起人畜的创伤性感染。鸡的坏死性肠炎就是由A或者C型产气荚膜梭菌引起的,它能导致鸡的小肠粘膜出血、坏死。近年来,随着国内外对抗生素和促生长剂的使用要求越来越严格,产气荚膜梭菌病的危害越来越严重,不仅造成养殖业巨大的经济损失,也危害公共安全。本研究首先采集了临床爆发产气荚膜梭菌病的样品,利用TSC双层平板法进行分离,参照已发表的引物对分离的菌株进行multiplex-PCR分型,并对已鉴定的产气荚膜梭菌,用药敏纸片法进行12种药物的药敏试验。结果成功分离出7株A型产气荚膜梭菌,并发现这7株产气荚膜梭菌均存在3种以上的多重耐药,其中所有菌株对庆大霉素、四环素、复方新诺明耐药,对其它药物也存在不同程度的耐药,实验表明产气荚膜梭菌耐药性严重,急需寻找新的治疗方法解决产气荚膜梭菌带来的危害。本研究从噬菌体裂解酶的角度出发,合成了产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶基因Cp51,Cp78和Cpzp,并分别构建了pET32a-Cp51,pET32a-Cp78和pET32a-Cpzp原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导以及镍柱纯化后,获得了可溶性的Cp51,Cp78和Cpzp的重组蛋白;后用比浊法检测Cp51,Cp78和Cpzp重组蛋白的体外杀菌活性,结果显示三种噬菌体裂解酶的裂解活性为Cp51>Cp78>Cpzp,且产气荚膜梭菌的噬菌体裂解酶对其他种类细菌无杀菌效果。研究表明A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51对A型产气荚膜梭菌有很强的杀菌活性和特异性,为后续的临床应用研究奠定基础。探索艾美耳球虫与产气荚膜梭菌共感染的产气荚膜梭菌病动物模型的建立,将14日龄的鸡先口服混合的巨型、毒害、柔嫩和堆型艾美耳球虫卵囊,在感染球虫的4天后即18日龄,再感染产气荚膜梭菌的临床分离株,在感染产气荚膜梭菌两天后,统计相对增重,病变评分,细菌计数等指标。结果表明产气荚膜梭菌+球虫共感染后,其体重指标与单独感染产气荚膜梭菌或单独感染球虫相比下降明显,出现典型病变,肠道中产气荚膜梭菌大量增殖,上述结果表明产气荚膜梭菌疾病模型初步构建成功。应用产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51对产气荚膜梭菌疾病模型进行治疗,并设立药物组地美硝唑和细胞壁水解酶进行对照,结果显示裂解酶Cp51治疗组的体重下降较少,病变计分和细菌计数均低于不治疗的阳性组,但是与药物治疗组相比还存在一定差距。结果表明产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51在治疗产气荚膜梭菌疾病时有一定的效果。综上所述产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶在体外杀菌实验中表现出巨大的潜力,又有快速高效等优点,在治疗细菌性疾病时具有较大的发展空间,但将其运用于临床时还要需要更多的探索。