目的：
　　垂体泌乳素瘤是一种常见的垂体瘤，常因过量的泌乳素分泌和肿瘤压迫使患者出现闭经、溢乳、不孕不育和垂体占位效应等临床表现。目前，垂体泌乳素瘤的药物治疗主要是以卡麦角林（CAB）为代表的多巴胺受体激动剂。然而目前临床上仍有约11%的患者存在对CAB治疗的耐药。本研究的重点是microRNA-17-5p在大鼠垂体泌乳素瘤MMQ细胞对CAB治疗反应性中的作用和机制。初步探索了microRNA-17-5p靶向治疗垂体泌乳素瘤的可行性。
　　方法：
　　根据ATCC细胞培养方案培养购自美国ATCC细胞库的大鼠垂体泌乳素瘤MMQ细胞系，以维持良好的细胞状态。利用miR-17-5p类似物（mimics）和miR-17-5p抑制物（inhibitors）分别转染MMQ细胞以构建miR-17-5p高表达MMQ细胞模型和miR-17-5p低表达MMQ细胞模型，随后的实时荧光定量PCR（qRT-PCR）用于验证转染效率。利用CCK-8法检测miR-17-5p过表达和敲减后的MMQ细胞的细胞增殖率和对CAB耐药性的变化。通过生物信息学方法预测MMQ细胞中miR-17-5p的靶标，然后通过荧光素酶报告基因测定验证靶基因。qRT-PCR和WesternBlot用于验证miR-17-5p表达对靶基因表达的影响。通过慢病毒转染的方式过表达MMQ细胞中的靶点基因（PTEN），采用WesternBlot法检测转染效率，通过CCK-8测定验证了PTEN过表达对MMQ细胞中CAB抗性的影响。
　　结果：
　　1.miR-17-5p对MMQ细胞增殖效率的影响：qRT-PCR结果显示用miR-17-5p模拟物转染后miR-17-5p的相对表达显著上调（约8-10倍）。CCK-8结果提示miR-17-5p过表达MMQ细胞的细胞增殖活性明显高于对照，且时间越长，差异越明显。qRT-PCR结果表明经miR-17-5pinhibitors敲减后的MMQ细胞miR-17-5p的相对表达显着低于先前（约为对照的1/4至1/2）。CCK-8结果显示miR-17-5p敲减的MMQ细胞的增殖活性明显低于对照，差异与时间相关。
　　2.miR-17-5p对MMQ细胞耐药性的影响：CCK-8的结果显示CAB对野生型MMQ细胞的杀伤效率约为50％。单纯的miR-17-5p过表达对MMQ细胞无明显杀伤性，miR-17-5p的过表达在一定程度上能抑制CAB对MMQ细胞的杀伤。类似的，CCK-8实验表明单纯的miR-17-5p敲减能轻微地杀伤MMQ细胞，并且miR-17-5p的敲低可以增强MMQ细胞对CAB的敏感性并改善药物的杀伤效果。
　　3.miR-17-5p对PTEN表达的影响：生物信息学分析预测miR-17-5p靶向PTEN基因的276-282位点。随后的荧光素酶报告基因测定验证了miR-17-5p与PTEN结合的特异性。WesternBlot和qRT-PCR结果表明，miR-17-5p过表达后MMQ细胞中PTEN基因的表达下调。类似地，在miR-17-5p敲低后，PTEN基因的表达水平显着上调。
　　4.PTEN表达上调对MMQ细胞耐药性的影响：通过慢病毒转染过表达MMQ细胞的PTEN基因，通过WesternBlot验证转染效率。CCK-8测定的结果显示miR-17-5p的过表达增强了MMQ细胞对CAB的抗性。在此基础上，PTEN过表达可部分逆转MMQ细胞的耐药性。
　　结论：
　　miR-17-5p可通过下调PTEN的表达促进MMQ细胞的增殖，降低其对CAB治疗的反应。