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凋亡是细胞的一种程序性死亡方式,它能够使多细胞生物维持体内平衡,消除威胁其生存的单个细胞,对多细胞生物的健康和生存有着至关重要的作用,细胞凋亡也是肿瘤细胞中抗癌药物诱导的最常见的细胞死亡模式之一。TMEM231属于TMEM蛋白家族的两次跨膜蛋白,在纤毛细胞中位于纤毛的过渡区,在无纤毛细胞主要定位在质膜,线粒体,细胞核和内质网,并且和其它Meckel syndrome(MKS)复合蛋白共同建立了过渡区,可以阻止蛋白进入细胞。现在对TMEM家族的研究主要集中在纤毛的发生以及纤毛相关的疾病,少部分的研究是和癌症相关的。我们查阅相关数据库和文献发现TMEM231与TNFRSF10B之间可能存在着相互作用,因此,我们猜测TMEM231可能与细胞凋亡有关。首先,我们在非小细胞肺癌细胞(non-small cell lung cancer cell,NSCLC)系Calu-1、H460和H1299中敲低或外源表达TMEM231,Western Blot实验结果表明,TMEM231能够降低NSCLC细胞TNFRSF10B的蛋白水平,并抑制凋亡相关蛋白的切割。利用流式细胞术检测外源过表达或敲低TMEM231后对细胞凋亡的影响,也得到了和上述一致的实验结果。接着在H1792中过表达TNFRSF10B的两个变体,免疫共沉淀实验检测到TNFRSF10B短变体和内源的TMEM231存在相互作用,在Calu-1中过表达TMEM231-FLAG,免疫共沉淀实验检测到了 TNFRSF10B的短变体,这表明TMEM231-FLAG与TNFRSF10B的短变体之间存在相互作用;又利用免疫荧光的方法证明它们存在着共定位;免疫共沉淀的方法检测了内源的TMEM231与内源的TNFRSF10B也存在相互作用。其次我们用免疫荧光的方法,在激光扫描共聚焦荧光显微镜下检测到了TMEM231定位于内质网上。我们又通过流式细胞术检测到TMEM231能够抑制TNFRSF10B在质膜上的分布。在A549中,敲低TMEM231并用凋亡诱导药物PEM(pemetrexed)处理不同时间,免疫荧光染色后激光扫描共聚焦荧光显微镜观察TNFRSF10B和早期胞内体标志物EEA1的共定位,结果表明,敲低TMEM231会导致EEA1与TNFRSF10B的共定位减少,而TNFRSF10B在质膜上的定位增加。因此TMEM231可能是通过降低TNFRSF10B的内吞而增加其在质膜上的定位。最后,在Calu-1中过表达TMEM231做免疫共沉淀,证明了 TMEM231与RAB9A(主要定位于晚期胞内体)存在相互作用。这预示着TMEM231可能会通过影响RAB9A进而影响TNFRSF10B的膜泡运输。综上所述,我们用非小细胞肺癌细胞为模型,得出了 TMEM231下调TNFRSF10B,并可能通过RAB9A影响TNFRSF10B的膜泡运输,进而下调细胞凋亡的结论。