目的:越来越多的证据表明,肿瘤细胞与其周围的肿瘤微环境之间的相互作用对肿瘤的发展有着密不可分的关系。肿瘤细胞与肿瘤微环境中免疫细胞组分的相互作用,成为近年来肿瘤与抗肿瘤免疫研究的热点。随着,研究不断的深入,人们发现,越来越多的在细胞内发挥重要作用的相关蛋白,在细胞外逐渐被学者们关注,并证实在重塑肿瘤微环境中发挥不可或缺作用。因此,探讨细胞内重要相关蛋白的分泌行为及其在肿瘤微环境中的相互作用,对于全面剖析肿瘤的进程,进一步完善肿瘤发展的分子机制,为以后肿瘤治疗奠定理论基础,具有重要的科学意义。p53,作为细胞内重要的抑癌基因,编码的蛋白质,在细胞周期阻滞、细胞衰老与凋亡以及细胞恶性转变等维持细胞内环境稳态中发挥重要作用。在人类肿瘤中,约有50%肿瘤存在p53基因突变,大多数突变发生在p53核心结构域,以构象改变或者完整性改变的方式,达到反义突变的目的,在肿瘤中发挥着与野生型相反的促肿瘤作用。p53和p53突变体,作为细胞内重要的蛋白,主要定位于细胞核和细胞浆,并且几乎所有的研究都聚焦于细胞内的机制与功能。尽管研究很少,但也有文章报道p53蛋白能够被分泌到细胞外,也能够被周围的受体细胞所内吞到胞内。但是,p53分泌的调节机制以及p53突变体的分泌行为仍未被更为清楚的证实。更为重要的是,关于p53突变体分泌行为对于其发挥促肿瘤作用是否具有推动作用,我们仍不得而知。因此,深入研究p53突变体的调控机制及其分泌功能,将有助于以全新的视角,更好地加深对其致癌活性的认识。方法:1、利用免疫共沉淀技术,富集培养基中肿瘤细胞分泌的p53蛋白,证实p53蛋白及癌基因相关p53突变体蛋白的分泌行为。2、利用分子生物学手段,探讨p53蛋白与p53突变体蛋白分泌的内在调控机制。3、利用Co-IP和Western blot技术,证实p53磷酸化状态对p53与p53突变体蛋白分泌的影响。4、利用Seahorse代谢分析仪分析p53突变体对T淋巴细胞糖代谢的影响。5、利用流式细胞仪检测p53突变体影响T淋巴细胞代谢所致的细胞凋亡结果的检测。结果:1、p53与癌基因相关的p53突变体是一个可动态进出细胞内外的分泌蛋白。2、p53蛋白与p53突变体的分泌行为与其氨基端的双亮氨酸基序有关。3、p53分泌行为是通过双亮氨酸基序与衔接蛋白的β亚基（βsubunit of Adaptor protein,β-AP）发生相互作用而实现的。4、p53突变体蛋白的分泌是一种受到细胞内外因素影响的程序调控行为。5、p53 Ser20磷酸化抑制p53与p53突变体的分泌行为。6、分泌型p53 R273H突变体影响Jurkat T淋巴细胞的糖代谢水平。7、p53 R273H突变体促进Jurkat T淋巴细胞低糖诱导的细胞凋亡。结论:1、p53与癌基因相关的p53突变体是新的分泌蛋白。2、p53 R273H突变体的分泌行为被其Ser20磷酸化状态所调控。3、p53 R273H突变体抑制Jurkat T淋巴细胞糖代谢,并且促进低糖诱导的T淋巴细胞凋亡。