MicroRNA-149对SW480细胞增殖和凋亡的影响及初步分子机制研究

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目的:结肠癌是当今社会一种常见的恶性肿瘤,我国结肠癌的发病率位居世界第三名。现在结肠癌主要采用以手术为主,化疗等为辅的治疗手段。对于结肠癌早期患者来说,手术治疗后的存活率较高。但是对于已经发生肿瘤转移的结肠癌患者来说,采用手术治疗会发生较高的致死率。近年来微小RNA(mi RNA)在肿瘤发生中的靶向作用受到了极大的关注,mi R-149被发现参与了如乳腺癌、肺癌等多种疾病发生的过程。本实验设计了mi R-149的增强序列mi R-149 mimics,探究了mi R-149对结肠癌SW480细胞中各种生物学行为的影响,为结肠癌的早期发现及治疗提供了新的思路。方法:本实验设计合成了mi R-149 mimics、NC序列,转染人结肠癌SW480细胞,24h后通过q PCR检测SW480细胞中m RNA表达水平。转染24、48、72h后通过CCK8法检测mi R-149对SW480细胞增殖的作用。转染24h、48h后用流式细胞术检测mi R-149对SW480细胞凋亡的影响。通过Transwell实验探究mi R-149对细胞迁移和侵袭的影响。通过q PCR和Western blot法检测mi R-149对其他基因相互间的作用。结果:(1)设计合成的mi R-149 mimics序列能促进mi R-149中m RNA的表达。(2)CCK8,Transwell和流式凋亡实验结果表明mi R-149可以抑制SW480细胞的增殖,降低SW480细胞的迁移和侵袭能力,促进SW480细胞的凋亡。转染后的SW480细胞在24h时的增殖抑制率为12.52%,细胞凋亡率为18.28%,并且迁移和侵袭能力明显低于对照组(P<0.05)。(3)q PCR和WB实验结果表明mi R-149能上调SW480细胞中Caspase3和Bax的m RNA与蛋白表达,下调Bcl-2的表达,从而引起SW480细胞的凋亡。结论:(1)设计合成的mi R-149 mimics序列能够促进SW480细胞中mi R-149的m RNA的表达。(2)mi R-149可以抑制SW480细胞的增殖、迁移和侵袭的能力,促进SW480细胞的凋亡。
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