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化学发光磁酶免疫法是将化学发光分析方法、磁性分离技术和酶免疫分析手段三者结合起来的一种新的分析方法。它利用了化学发光分析方法的高灵敏度,磁性分离方法的快速、易自动化及免疫分析方法极高的特异性等特点,在生物分析中具有广阔的应用前景。本文用化学发光磁酶免疫法检测了食品中O157:H7大肠埃希菌和血清中游离β-hCG的含量,实验过程中对分析条件进行了优化,将分析结果与其他分析方法进行了比较。论文主要工作如下:一、免疫磁珠的制备表面修饰有氨基的磁珠与戊二醛作用,通过氨基与醛基的缩合反应,戊二醛的一个醛基与磁珠结合,另一个醛基暴露在磁珠表面。暴露在磁珠表面的醛基与所加入的单克隆抗体蛋白的氨基发生缩合反应,将抗体偶联到磁珠的表面,从而制备出免疫磁珠。所制备出的免疫磁珠具有识别和捕获相应抗原的能力,二、化学发光磁酶免疫法测定食品中O157:H7大肠埃希菌的含量采用高灵敏度,信号稳定的化学发光分析法对O157:H7大肠埃希菌进行检测,并对实验条件进行优化,建立化学发光磁酶免疫检测方法。方法中用3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3′′-邻氧酰苯基)-1,2-二氧杂环丁烷(AMPPD)和碱性磷酸酶(ALP)为化学发光体系,对食品中O157:H7大肠埃希菌进行检测,其最低检出限为8.5×104 /mL,线性范围为1.0×105~5.0×107 /mL,组间变异(CV%)为20.0%,组内变异(CV%)为14.8%。与人工计数培养检测法相比,两者相关系数为0.981。结果表明,化学发光磁酶免疫分析法检测精密度好、灵敏度高和分析线性范围宽,加之该法操作简便、分析速度快,有望用作食品中O157:H7大肠埃希菌污染的标准或参照检测方法。三、化学发光磁酶免疫法测定血清当中游离β-hCG的含量采用化学发光磁酶免疫检测方法对血清中游离的β-hCG进行了检测,并对实验条件进行了优化。利用AMPPD- ALP化学发光体系进行检测时,其检测灵敏度较分子吸收分光光度免疫法提高了10倍,线性范围达0.45~185.2 mIU/mL,批间变异和批内变异(CV%)均小于12%,回收率在84%~120%之间。本法与分光光度法相比,两者相关系数为0.955。因此,实验结果表明,化学发光磁酶免疫分析法检测精密度、灵敏度和分析线性范围均优于分光光度免疫分析法,可以作为血清中游离的β-hCG水平检测的一种可靠方法。