红花黄色素提取分离及活性初步研究

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心脑血管疾病是一种严重威胁人类,特别是50岁以上中老年人健康的常见病。据统计,全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人,居各种死因首位。我国每年死于心脑血管疾病近300万人,占我们国家每年总死亡病因的51%。心脑血管疾病已成为人类死亡病因最高的头号杀手,因此,积极预防和治疗心脑血管疾病已迫在眉睫。红花(Carthamus tinctorius L.)系菊科红花属红花的干燥花,是活血化瘀的传统中药,但其作用机理尚不完全明确。本文旨在揭示红花活血化淤药效成分及其作用机理,为开发新的红花制剂提供参考。因此,本文主要对以下几个方面进行了研究:1、羟基红花黄色素A和红花黄色素B分离鉴定。采用柱色谱法分离纯化羟基红花黄色素A,在此过程中,发现一新的化合物,其紫外、红外、1HNMR和HPLC均与羟基红花黄色素A一致,我们推测其可能为羟基红花黄色素A的非对映异构体。采用制备液相色谱法从红花中分离得到红花黄色素B,经1HNMR和13CNMR鉴定,并与文献对照,确定其为红花黄色素B。2、羟基红花黄色素A可能非对映异构体Ⅰ、Ⅱ和红花黄色素B抗凝活性初步研究。羟基红花黄色素A可能非对映异构体Ⅰ和红花黄色素B可抑制ADP和Coll诱导家兔体外血小板聚集,且可延长大鼠血浆APTT,其中红花黄色素B作用更强;而羟基红花黄色素A可能非对映异构体Ⅱ则具相反作用,即促进ADP和Coll诱导的家兔体外血小板聚集,且缩短大鼠血浆APTT。红花是活血化瘀的常用中药,本文首次从中发现了与其药效原理相悖的物质。3、羟基红花黄色素A水解初步研究。分别在碱性条件下和纯水中加热水解羟基红花黄色素A,结果发现,碱性条件下水解有对羟基肉桂酸生成,而纯水条件下则无。碱性条件下水解产物无抗血小板聚集活性;纯水条件下水解产物无抗血小板聚集活性,但可延长大鼠血浆PT和TT,缩短大鼠血浆APTT,且水解产物经柱色谱分离,95%乙醇洗脱部分具抑制ADP诱导大鼠体外血小板聚集作用。4、羟基红花黄色素A提取纯化工艺研究。确定了提取工艺:加水量30倍、时间45min、温度60℃,分2次提取。纯化工艺确定了初分离柱1和纯化柱2的上样量均为90g红花/100g柱材料,径高比分别为1:15和1:5,洗脱剂乙醇的浓度分别为30%和10%,该方法得到羟基红花黄色素A纯度大于85%,收率也较高。
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