【摘 要】
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目的:构建人野生型PTEN基因绿色荧光蛋白真核表达载体,观察PTEN基因在体内、体外对乳腺癌的抑制作用,并初步探讨其对肿瘤抑制作用的机制.方法:采用套式PCR方法构建表达载体并
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目的:构建人野生型PTEN基因绿色荧光蛋白真核表达载体,观察PTEN基因在体内、体外对乳腺癌的抑制作用,并初步探讨其对肿瘤抑制作用的机制.方法:采用套式PCR方法构建表达载体并鉴定。将重组质粒转染入PTEN缺失的乳腺癌细胞中,观察PTEN基因在体外对乳腺癌细胞的抑制作用,建立裸鼠移植瘤模型,应用PTEN基因或联合化疗药物观察PTEN基因在体内的抑瘤作用。结果:酶切图谱及序列测定重组质粒与GeneBank中公布的序列完全一致。PTEN基因在体外能够诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制乳腺癌细胞增殖。在体内PTEN基因可明显抑制肿瘤的生长,PTEN基因与化疗药物联合应能提高抑瘤效应。结论:成功构建了人野生型PTEN基因绿色荧光蛋白真核表达载体,PTEN基因在体内和体外均有抑制肿瘤的作用。
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