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研究目的:探讨IgA肾病患者血浆中升高的BAFF可通过激活肾小球系膜细胞TRAF6/NF-κB信号通路参与IgA肾病的发病机制,且血浆BAFF水平与IgA肾病的严重程度呈正相关。研究方法:1.收集2016年2月至2017年12月于我院经肾活检诊断为原发性IgA肾病患者58例,同时收集我院泌尿外科就诊的20例因肾肿瘤行一侧肾脏切除的患者作为对照组,检测患者血浆中BAFF水平,根据IgA肾病Katafuchi积分标准对IgA肾病患者进行肾脏病理评分,根据评分结果进行分组,分别检测各组肾组织中BAFF、FN、TRAF6、P-NF-κBp65、CTGF 的表达。2.原代培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为5组,con-shRNA（对照组）,con-shRNA+BAFF（与 20ng/ml BAFF 共培养）,con-shRNA++BAFF+BAFF-Fc chimera protein（500ng/mL,加入 BAFF 之前 30min）,TRAF-shRNA（转染 shRNA-TRAF6 质粒）和 TRAF-shRNA+BAFF 组（转染 shRNA-TRAF6 质粒+20ng/ml BAFF）。3.实时荧光定量PCR方法检测系膜细胞FN-RmRNA、TRAF6mRNA、CTGFmRNA表达及核内NF-κBp65mRNA的表达。4.蛋白质印迹法（western-boltting）检测系膜细胞TRAF6、FN、CTGF及核内P-NF-κBp65的蛋白表达水平。5.60只SD大鼠按随机数字法分成4组:con-siRNA（对照组）,con-siRNA+IgA（IgA 肾病组）,BAFF-RFc+IgA（注射BAFF 中和性抗体）,TRAF6-siRNA+IgA（TRAF6-siRNA与EntransterTM-in vivo按1:2混合,经尾静脉注射1ml,24h后进行相关实验）。6.建模完成后处死大鼠,留取血清标本,检测血清肌酐、24小时尿蛋白定量等指标,同时留取左侧肾脏,10%中性甲醛溶液固定,-80℃保存备测。7.免疫组化染色检测大鼠肾脏病理切片中BAFF、FN、TRAF6、CTGF、P-NF-κBp65的表达。8.Western-boltting 检测大鼠肾组织中 BAFF、FN、TRAF6、CTGF、P-NF-κBp65蛋白的表达。研究结果:1.IgA肾病患者血浆BAFF水平与病理损害的严重程度呈正相关。随着病理损害的加重,IgA肾病患者蛋白尿水平呈增加趋势,其血浆BAFF浓度亦明显上升,与肾脏病理损害程度呈正相关（r=0.45,r=0.62;P＜0.05）。而内生肌酐清除率下降,与肾脏病理损害程度呈负相关（r=-0.72,P＜0.05）。IgA肾病患者肾组织中BAFF、FN、TRAF6、P-NF-κBp65、CTGF的表达均较对照组明显增多,且主要分布于肾小球系膜区。2.BAFF可诱导肾小球系膜细胞FNmRNA、TRAF6mRNA、CTGFmRNA及细胞核内NF-κBp65mRNA的表达明显增强。加入BAFF与肾小球系膜细胞共培养48h后,系膜细胞TRAF6mRNA及细胞核内P-NF-κBp65mRNA的表达较明显增强,同时其下游致纤维化因子FNmRNA、CTGFmRNA的表达也增强（P＜0.05,与对照组比）。经shRNA-TRAF6质粒转染的系膜细胞,其几乎不表达TRAF6mRNA（P＜0.05,与对照组比）。经BAFF干预48h后,con-shRNA++BAFF+BAFF-Fc chimera protein 组及 shRNA-TRAF6 组其核内 NF-κBp65mRNA的表达明显降低,同时其下游致纤维化因子FN、CTGFmRNA的表达也降低（P＜0.05,与 con-shRNA+BAFF 组比）。3.BAFF可诱导肾小球系膜细胞FN、TRAF6、CTGF及细胞核内P-NF-κBp65蛋白的表达加强。经BAFF干预肾小球系膜细胞48h后,系膜细胞中TRAF6及细胞核内P-NF-κBp65蛋白的表达较对照组明显增强,同时其下游因子FN、CTGF蛋白的表达也增强（P＜0.05,与对照组比）。经shRNA-TRAF6质粒转染的系膜细胞,其几乎不表达TRAF6蛋白（P＜0.05,与对照组比）。加入BAFF干预48h后,con-shRNA++BAFF+BAFF-Fc chimera protein 组及 shRNA-TRAF6 组其核内 P-NF-κBp65蛋白的表达明显降低,同时其下游因子CTGF蛋白的表达也降低（P＜0.05,与con-shRNA+BAFF 组比）。4.IgA肾病模型大鼠血浆BAFF水平及蛋白尿、血肌酐水平明显升高。IgA肾病模型组大鼠蛋白尿、血肌酐浓度及血浆BAFF浓度均较对照组明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05,与对照组比）。而BAFF-RFc+IgA组及TRAF6-siRNA+IgA组,上述各指标较IgA肾病模型组明显降低（P＜0.05,与IgA肾病模型组比）。5.TRAF6-siRNA可阻断大鼠肾组织中TRAF6的表达予大鼠尾静脉注射TRAF6-siRNA 1ml后,IgA肾病大鼠肾组织中TRAF6蛋白的表达明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05,与对照组比）。6.IgA肾病模型大鼠肾病理切片中BAFF、FN、TRAF6、P-NF-κBp65、CTGF的表达明显增加。肾组织切片免疫组化染色显示IgA肾病组大鼠肾组织中BAFF、FN、TRAF6、P-NF-κBp65、CTGF的表达均较对照组明显增多（P＜0.05）,且主要分布在系膜区。BAFF-R Fc+IgA组和TRAF6-siRNA+IgA组,BAFF的表达与IgA肾病模型组无明显差异（P＞0.05）,但TRAF6、P-NF-κBp65及CTGF、FN的表达与IgA肾病模型组相比明显降低（P＜0.05）。7.IgA肾病模型大鼠肾组织中BAFF、FN、TRAF6、P-NF-κBp65、CTGF的表达明显增加。干预TRAF6/NF-κB信号通路中的相关因子,可明显降低致纤维化因子的表达。IgA肾病模型组中BAFF、FN、TRAF6、CTGF及核内p-NF-κBp65蛋白的表达较正常对照组明显增强（P＜0.05）。BAFF-R Fc+IgA组和TRAF6-iRNA+IgA组中,BAFF蛋白的表达与IgA肾病模型组无明显差异（P＞0.05）,但TRAF6、FN、CTGF及核内p-NF-κBp65蛋白的表达与IgA肾病模型组相比明显降低（P＜0.05）。研究结论:BAFF可通过激活肾小球系膜细胞TRAF6/NF-κB信号通路激活系膜细胞生成大量促纤维化因子CTGF和FN等,导致系膜细胞及基质的增生,参与IgA肾病的发生。大鼠IgA肾病模型的研究进一步验证了体外实验的结果。提示IgA肾病患者血浆中BAFF水平的升高直接参与其肾脏损害,最终导致肾小球硬化。