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18日龄鸡胚经羊膜腔接种14.4×104个/胚的E.tenella孢子化卵囊后,分别于19、20d胚龄剖取5枚鸡胚,依次检测体表、肌胃和肠道内的卵囊。出雏后1～4日龄间每天剖杀若干鸡只,检查肌胃和肠道内容物中的卵囊,刮取盲肠粘膜直接压片镜检裂殖体。结果显示,胚胎注射卵囊2d后,即20日胚龄时可在胚体的被毛、肌胃和肠道内检测到卵囊,且仅于出雏后4.5d可在盲肠壁中检测到第二代裂殖体,表明接种的卵囊在胚胎期就可以进入消化道,但只是在出雏后才建立感染的。分别以1×103、1×104和1×105个/胚的E.tenella或E.acervulina或E.maxima孢子化卵囊经羊膜腔接种18日龄鸡胚,出雏后在无球虫环境中笼养,1～11日龄间每天收集各虫种最高剂量组的粪便样本,计数克粪便卵囊数(OPG),并于14日龄时分别以1.37×105个/只E.tenella孢子化卵囊或4×105个/只E.acervulina孢子化卵囊或4×105个/只E.maxima孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、饲料转化率(FCR)、相对卵囊产量(ROP)、血便记分(E.tenella)和病变值(E.tenella、E.maxima)评价免疫保护效果。结果显示,以E.tenella或E.acervulina或E.maxima孢子化卵囊免疫18日龄鸡胚,其卵囊排出的潜隐期及达到峰值的时间与1日龄雏鸡接种组相一致,即卵囊最早排出分别在出雏后第4(E.acervulina)、5(E.tenella、E.maxima)天,卵囊排出峰值分别在出雏后第6(E.acervulina)、7(E.tenella、E.maxima)天,进一步提示其诱导的免疫是在出雏后才开始建立的。攻虫后各免疫组的RWG由未免疫攻虫对照组的21.1%～54.7%提高到了56.0%～86.4%,FCR由未免疫攻虫对照组的3.86～4.47改善为2.24～3.82。ROP降至9.4%～84.1%。结果表明,以103～105个/胚的E.tenella或E.acervulina或E.maxima孢子化卵囊经羊膜腔接种18日龄鸡胚都可以建立起一定程度的针对出雏后14日龄同源攻虫的免疫保护力,尤以104个/胚(E.tenella)或105个/胚(E.acervulina、E.maxima)剂量组的保护效果最佳。给18日龄鸡胚经羊膜腔混合接种1×104个/胚E.tenella和1×105个/胚E.acervulina孢子化卵囊,出雏后在无球虫环境中笼养,于14日龄时以1.2×105个/只E.tenella孢子化卵囊或5.2×105个/只E.acervulina孢子化卵囊分别攻虫,以RWG、FCR和ROP评价免疫保护效果。攻虫后各混合免疫组的RWG由未免疫攻虫对照组的31.9%～51.7%、单虫种免疫组的76.5%～80.1%提高到了77.3%～83.6%,FCR改善为2.72～2.84,ROP降至4.7%～40.4%。结果显示,18日龄鸡胚混合免疫E.tenella和E.acervulina孢子化卵囊可以诱导雏鸡产生较强的免疫保护力,其各项指标均略优于单虫种免疫组。