七氟醚通过PICK1/ERK1/2/GSK3 β信号抑制记忆巩固的研究

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目的:探讨吸入麻醉药七氟醚对记忆巩固的影响及PICK1/ERK1/2/GSK3β信号通路在其中所起的作用。方法:动物实验应用C57BL/6 PICK1基因敲除小鼠进行七氟醚处理(2%,3h)。提取动物海马组织蛋白,应用免疫印迹检测PICK1、ERK1/2、p-ERK1/2、GSK3β及p-GSK3β蛋白表达变化。离体实验应用原代海马神经细胞,加入ERK1/2磷酸化激动剂Honokiol和/或PICK1抑制剂FSC231,然后再进行七氟醚处理(2%,3 h),收集蛋白检测p-GSK3β蛋白表达变化。动物行为学实验中,针对PICK1基因敲除小鼠给予七氟醚处理(2%,3 h),应用旷场实验检测动物运动能力变化;应用抑制性逃避实验检测动物记忆巩固的变化。结果:在体实验中,单独进行七氟醚处理或敲除PICK1基因均可明显降低PICK1、p-ERK1/2及p-GSK3β的蛋白表达水平。与七氟醚组相比,PICK1基因敲除+七氟醚处理组,p-ERK1/2及p-GSK3β的蛋白表达水平进一步降低。离体实验中,七氟醚降低p-GSK3β蛋白表达水平;加入Honokiol可使p-GSK3β蛋白表达增加;而再加入FSC231则可逆转由Honokiol引起的p-GSK3β蛋白变化。行为学结果显示,动物运动能力无明显变化,而七氟醚可抑制记忆巩固;PICK1基因敲除小鼠进行七氟醚处理,则可加重抑制记忆巩固。结论:七氟醚可抑制记忆巩固过程,其机制可能与PICK1/ERK1/2/GSK3β信号通路受抑制相关。
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