棒曲霉素分子印迹毛细管电泳检测研究

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棒曲霉素,又称展青霉素,是广泛存在于食品中的由青霉菌属、曲霉属、丝衣霉属产生的有毒次级代谢产物。由于其具有致畸致癌致突变,有免疫毒性、遗传毒性和引起胃肠道反应的危害,对人体也是潜在的危害来源。常见于苹果、苹果制品及其他食品中,许多国家和地区分别制定了果制品中棒曲霉素的最大限量。近几年对棒曲霉素的痕量检测也成为国内外研究的热点。高效液相色谱法(HPLC)是目前最常规的检测手段,然而利用HPLC检测棒曲霉素时,5-羟甲基糠醛的干扰大大影响了检测的准确性和灵敏性。所以研究开发一种能够快速准确并且具有高效特异性识别的检测方法变得至关重要。  毛细管电色谱结合了高效液相色谱和毛细管电泳的优点,使其在分离领域展现出了强大的潜力。毛细管色谱柱作为毛细管电色谱的“心脏”,对毛细管电色谱的分离性能有着至关重要的影响。本实验主要制备和评价一种代替模板的分子印迹毛细管整体柱作为固定相,并利用毛细管电泳仪进行分离检测食品中的棒曲霉素。实验中优化的制备条件是:假模板2-吲哚酮3.328 mg,功能单体甲基丙烯酸8.6μL,交联剂乙二醇甲基丙烯酸酯50μL,甲醇300μL,甲苯60μL,十二烷醇140μL混合均匀后,于60℃下水浴16 h。通过优化毛细管电色谱的分离条件,成功分离了棒曲霉素和5-羟甲基糠醛,且分离度为1.58。  针对本方法进行了验证试验,包括选择性、线性、检出限和定量限、精密度试验等。将实际样品经简单前处理之后,通过空白样品检测及加标回收试验后,回收率在86%-106%之间。由此可知,本方法制备的分子印迹毛细管整体柱有良好通透性和机械稳定性且可进行定量分析。
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