MicroRNA-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响

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目的:探讨MicroRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用人工合成的miR-199a-3p模拟物(mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),从而获得高表达miR-199a-3p的骨肉瘤细胞。该实验分成空白对照组(不做任何特殊处理)、阴性对照组(转染阴性对照物mimics)、实验组(转染组miR-199a-3pmimics)。应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞在转染模拟物48小时后的miR-199a-3p的含量,应用Western blot法检测转染后各组细胞中髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(polyADP-ribose polymerase,PARP)的剪切情况,再利用流式细胞仪检测转染后各组细胞的凋亡率变化,并对各组实验结果进行统计学分析。结果:与空白对照组细胞及阴性对照组细胞相比,miR-199a-3p在转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中的含量显著比对照组细胞升高;实验组细胞中MCL-1蛋白的表达量则显著低于对照组细胞,且实验组细胞中的PARP出现明显的剪切条带,全长片段较弱;实验组细胞的凋亡率比对照组增高,各组实验结果存在的差异性均表明有着明显的统计学意义(P<0.05)。结论: miR-199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡,可能成为骨肉瘤基因治疗的新靶点。
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