目的:比较快速冷冻方法与慢速冷冻方法对皮肤组织中VEGF、TGF-β1表达,探讨深低温技术中比较不同冷冻方法对皮肤组织活性的影响。方法:25只健康新西兰大白兔随机数字表法均分为空白对照组、术后第1天、第3天慢速冷冻复温组、术后第1天、3天快速冷冻复温组。空白对照组直接取兔背皮肤组织;快速冷冻复温组:皮肤组织二甲基亚枫溶液中浸泡后以无菌生理盐水冲洗后,将皮片装入无菌双层密封袋内,直接投入液氮中保存;慢速冷冻复温组:兔背皮肤组织二甲基亚枫溶液中浸泡后以无菌生理盐水冲洗后,将皮片装入无菌双层密封袋内,经4℃冷冻1 h后,再经-20℃冷冻1h,又经过-80℃冷冻的1 h,程序性冷冻降温后再投入到液氮中;慢速冷冻复温组、快速冷冻复温组这两个组都经过慢速复温后均行皮肤打包回植,回植皮肤术后第1天、第3天,分别在术后第1天、第三天取兔背皮肤组织。5组兔背皮肤软组织均取兔背皮肤组织观察离体皮肤的的耗氧量及采用染色光镜形态学观察及免疫组织化学染色检测各组皮肤的病理变化。结果:1.苏木精-伊红(HE)染色结果:空白对照组与术后第1天、3天慢速冷冻复温组、术后第1天、3天快速冷冻复温组比较,P<0.001,认为差异有统计学意义,说明皮肤组织形态结构均比对照组欠规整,术后1天、3天的慢速冷冻复温组与术后1天、3天快速冷冻复温组之间有显著差异(t值为13.515,P<0.001),有统计学意义,说明实验各组经冷冻保存后,说明慢速冷冻方法的皮肤组织形态结构的病理变化逐渐减轻。2.离体皮肤氧耗量测定指标结果:相对于(新鲜皮肤)空白对照组,术后第1天、3天慢速冷冻复温组与术后第1天、3天的快速冷冻复温组比较,慢速冷冻复温组的皮肤耗氧量高于快速冷冻复温组,慢速冷冻复温组的皮肤的活性高于快速冷冻复温组,t值为5.134,P<0.001,并有统计学差异。3.皮肤组织免疫组化的指标结果:2种不同的冷冻方法皮肤真皮层中均可见VEGF呈斑片状的表达,空白对照组与其他四组比较,VEGF因子表达量均高于其他四组,P<0.001,具有统计学差异;术后第1天、3天慢速冷冻复温组与术后第1天、3天的快速冷冻复温组比较,慢速冷冻复温组的VEGF因子表达高于快速冷冻复温组,t值为12.890,P<0.001,VEGF因子表达具有统计学差异。2种不同的冷冻方法皮肤真皮层中均可见TGF-β1因子呈斑片状的表达,空白对照组与其他四组比较,TGF-β1因子表达量均高于其他四组,P<0.001,具有统计学差异;术后第1天、3天慢速冷冻复温组与术后第1天、3天的快速冷冻复温组比较,慢速冷冻复温组的TGF-β1因子表达高于快速冷冻复温组,t值为7.307,P<0.001,TGF-β1因子表达具有统计学差异。结论:1.皮肤组织经过冷冻复温后VEGF(血管内皮细胞生长因子)、TGF-β1(转化生长因子β1)活性不同程度降低;2.慢速冷冻复温组较快速冷冻复温组对皮肤组织影响小,慢速冷冻慢速复温组对VEGF、TGF-β1的活性影响较轻。