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随着越来越多的转基因作物的发展和商业化种植,转基因作物核酸快速提取及其检测技术的研究已经变得越来越必要。LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)是一种环介导的等温扩增方法,比较传统的聚合酶链式反应,它具有特异性高、简单、快速等特点,不需要精密昂贵的仪器(如:PCR仪)和繁琐凝胶电泳检测。由于实现了可视化的检测,在60分钟内就能完成检测,大大缩短了检测时间,适合转基因植物的现场快速检测。另外,现有的提取转基因作物的DNA方法所耗用的时间在90分钟左右,同时需要笨重的离心机作为提取时必需的仪器,我们研究了一种快速提取DNA的技术,可以将抽提DNA的时间由现有的90分钟左右缩短到10-15分钟左右。将快速提取DNA技术与快速检测LAMP方法相结合,就能在90分钟完成提取和检测转基因作物的整个过程,实现快速现场检测1、根据七种转基因玉米品系(DAS-59122-7, T25, BT176, TC1507, MON810, BT11 and MON863)的旁邻序列,设计品系特异性引物,优化LAMP反应体系,代替凝胶电泳方法,通过加入高浓度的SYBR Green I荧光染料的可视化方法来检测LAMP的产物。建立七种转基因玉米品系特异性检测的LAMP方法,同时将这种方法应用于实际样品的检测。实验结果证明建立的七种转基因玉米LAMP检测方法具有高特异性,除了MON810品系以外灵敏度都可以达到4个拷贝数的基因组DNA。并且将已经建立的检测方法运用于GIPSA(美国谷物检验、批发及畜牧场管理局)样品的检测,检测结果与最后的GIPSA的最终报告中结果相一致;2、本文研究转基因生物快速现场提取DNA技术,设计一种简单快速提取DNA的装置。这种技术采用气压法代替离心的方法,用简单的注射器的气压提取DNA的方法,代替笨重的离心机,将抽提DNA的时间由现有的90分钟左右缩短到10-15分钟左右,应用这种方法提取水稻,玉米,棉花,大豆的DNA,实现野外快速现场提取转基因作物的DNA。同时结合LAMP方法实现快速现场检测的目的。