日本马铃薯新品系高效再生体系的建立

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随着马铃薯新品种的出现以及在生产上的应用推广,由于基因型的差异,其脱毒快繁的培养体系及试管薯形成的条件有明显的差异。本论文以引进日本马铃薯新品系06-10为试验材料,对其节间培养及其增殖的条件进行了探讨,系统地研究了马铃薯高效再生体系建立和试管微型薯的诱导,建立起该日本马铃薯新品系的高效再生体系,对该马铃薯试管薯离体快繁的影响因素及调控机理进行了初步研究。在试验中成功获得了一批无菌苗,诱导出了试管微型薯,为今后的研究工作提供了材料和基础。试验结果表明:1.启动培养时用0.1%HgCl2 7min+75%的乙醇15s体表灭菌对该马铃薯品种的嫩茎消毒处理效果最佳,其污染率为12.5%。且最佳诱导培养基为MS+0.Smg/LIAA+0.1mg/LKT,芽分化成苗率最高达到了81.25%。2.不定芽的增殖。以日本马铃薯品系06-10节间为外植体,探讨了不同激素及组合、不同蔗糖浓度处理等对其不定芽分化及增殖的影响。结果表明,(1)适宜的不定芽分化的单因子激素诱导培养基为MS+CPPU 0.15 mg/L、MS+6-BA 1.5mg/L、MS+NAA0.1mg/L不定芽分化率分别达100%和94%,GA对不定芽的诱导呈现不规则的变化,且CPPU的作用强于6-BA、NAA、GA;(2)双因子激素组合比单一因素更有利于马铃薯试管苗的继代培养。马铃薯试管苗继代培养中低浓度NAA(0.1mg/L)与适当浓度CPPU(0.15 mg/L)配合使用、中高浓度GA(1.5 mg/L)与适当浓度CPPU(0.15 mg/L)配合使用有利于苗的生长,能够改善苗的综合素质;(3)蔗糖浓度为30g/L对试管苗的培养效果最佳;适当浓度的CPPU、NAA、GA组合,对马铃薯试管苗继代增殖培养效果显著;适当的CCC浓度(200mg/L)可以增加茎粗,对缩短试管苗的节间距效果显著。3.试管微型薯的诱导。(1)不同外源激素组合诱导试管薯的效果不同,结果表明:以激素组合NAA+CPPU+GA对试管微型薯的诱导效果最好;400 mg/L CCC+CPPU 0.15 mg/L处理促进了日本马铃薯品种06-10提早结薯,使单瓶试管薯数量、结薯率均有显著增加。(2) 8%蔗糖有利于诱导试管薯的诱导;(3)光照8h培养对马铃薯试管薯的诱导效果最佳。4.不定根的诱导。本试验研究了不同浓度的CPPU、6-BA、GA、NAA及组合配比对不定根形成的影响。结果表明,(1)根系最适宜的单因子激素诱导培养基为MS+NAA1.0mg/L,生根率达100%:(2)多因子激素诱导试管苗生根效果明显好于单因子的,平均生根率高达92.19%;添加了适当浓度的IBA后对马铃薯试管苗生根效果显著,处理MS+IBA0.5mg/L+CPPU0.1 mg/L+NAA1.0 mg/L+GA1.0mg/L诱导不定根分化效果最好,最佳培养时间为10~40d。5.试管苗移栽。用蛭石移栽的试管苗存活率达到了93.50%。效果较好。
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