三种蓝莓抗氧化及抗Hep G2细胞增殖活性研究

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蓝莓为杜鹃花科(Ericaceae)、越桔属(Vaccinium spp.)多年生灌木型小浆果,富含多种抗氧化活性物质,营养价值高。本论文对大兴安岭野生蓝莓(Vaccinium uliginosum L.)、贵州蓝莓(Vaccinium ashei Reade)和智利蓝莓(Vaccinium corymbosum L.)的活性物质含量、抗氧化活性以及抗Hep G2细胞增殖活性进行研究,主要研究内容和结果如下:1.三种蓝莓活性成分比较分析了大兴安岭野生蓝莓、贵州蓝莓和智利蓝莓的水分含量、鲜重、横径、可溶性固形物、可滴定酸、总多酚和总黄酮含量,采用高效液相色谱法分析了它们的花色苷含量。结果表明,大兴安岭野生蓝莓的平均重量和横径均显著低于贵州蓝莓和智利蓝莓(p<0.05),但三种蓝莓的水分、可溶性固形物和可滴定酸含量之间均没有显著性差异(p>0.05)。大兴安岭野生蓝莓中的总多酚、总黄酮和总花色苷含量均为最高。总多酚含量从高到低依次为大兴安岭野生蓝莓(1998.34±54.65 mg GAE/100 g DW),贵州蓝莓(1319.26±24.01 mg GAE/100 g DW)和智利蓝莓(958.69±40.87 mg GAE/100 g DW)。总黄酮含量从高到低依次为大兴安岭野生蓝莓(2065.56±38.46 mg RE/100 g DW),贵州蓝莓(1303.87±60.81 mg RE/100 g DW)和智利蓝莓(1037.67±25.52 mg RE/100 g DW)。总花色苷含量从高到低依次为大兴安岭野生蓝莓(14923.13±23.04μg/g DW),贵州蓝莓(14648.20±28.12μg/g DW)和智利蓝莓(8063.58±18.90μg/g DW)(p<0.05)。2.三种蓝莓抗氧化活性评价采用体外化学抗氧化法(DPPH法、ABTS法、FRAP法和ORAC法)以及细胞抗氧化活性分析法(CAA法)评价大兴安岭野生蓝莓、贵州蓝莓和智利蓝莓提取物的抗氧化活性。结果表明,三种蓝莓中大兴安岭野生蓝莓的抗氧化活性最强。DPPH值从高到低依次为大兴安岭野生蓝莓(342.82±14.82μmol TE/g DW),贵州蓝莓(184.88±9.83μmol TE/g DW)和智利蓝莓(159.65±11.34μmol TE/g DW);FRAP值从高到低依次为大兴安岭野生蓝莓(342.48±10.33μmol TE/g DW),贵州蓝莓(204.51±9.37μmol TE/g DW)和智利蓝莓(171.88±13.22μmol TE/g DW);大兴安岭野生蓝莓的ABTS值和ORAC值均为最高,分别为276.41±7.84μmol TE/g DW和488.86±17.13μmol TE/g DW。贵州蓝莓的ABTS值(183.28±16.43μmol TE/g DW)和智利蓝莓的ABTS值(167.86±10.76μmol TE/g DW)之间无显著性差异(p>0.05);同样的,贵州蓝莓的ORAC值(281.46±9.37μmol TE/g DW)与智利蓝莓的ORAC值(221.65±14.20μmol TE/g DW)之间无显著性差异((p>0.05))。CAA结果显示,未经PBS清洗处理时,大兴安岭野生蓝莓中CAA值最高(1349.99±42.19μmol QE/100 g DW),贵州蓝莓(579.36±21.03μmol QE/100 g DW)与智利蓝莓(602.24±30.88μmol QE/100 g DW)之间无显著性差异(p>0.05);经PBS清洗处理时,CAA值大小排列与未经PBS清洗处理时一致。未经PBS清洗处理时,EC50值从高到低依次为:贵州蓝莓(3.25±0.07 mg/mL)≈智利蓝莓(3.17±0.05 mg/mL)>大兴安岭野生蓝莓(1.26±0.05 mg/mL)。经PBS清洗处理时,EC50值大小排列与未经PBS清洗处理时一致。总多酚和总黄酮与DPPH值的相关性系数分别为0.975和0.991(p<0.01),与ABTS值的相关性系数分别为0.970和0.984(p<0.01),与ORAC值的相关性系数分别为0.939和0.967(p<0.01)。总多酚、总黄酮和总花色苷与FRAP值的相关性系数分别为0.985、0.996(p<0.01)和0.670(p<0.05)。未经PBS清洗处理时,总多酚和总黄酮与CAA值的相关性系数分别为0.930和0.962(p<0.01);经PBS清洗处理时,总多酚和总黄酮与CAA值的相关性系数分别为0.970和0.986(p<0.01)。3.三种蓝莓抗Hep G2细胞增殖活性比较了大兴安岭野生蓝莓、贵州蓝莓和智利蓝莓提取物对肝癌细胞Hep G2增殖的抑制活性。结果表明,三种蓝莓提取物均能显著抑制Hep G2细胞的增殖。在试验浓度(5、10、15、20、25、30、35、40 mg/mL)范围内,三种蓝莓提取物的Hep G2细胞增殖抑制率随着浓度增加而增加。大兴安岭野生蓝莓提取物的抗Hep G2细胞增殖活性最强(EC50=21.36±1.07 mg/mL),而贵州蓝莓(EC50=31.29±2.03 mg/mL)和智利蓝莓(EC50=30.08±1.87 mg/mL)之间无显著性差异(p>0.05)。总多酚、总黄酮与抗Hep G2细胞增殖EC50值的相关性系数分别为–0.825和–0.868(p<0.01),而总花色苷与EC50值的相关性为–0.411(p>0.05)。
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