Nrf2基因属于转录因子CNC家族,含有碱性亮氨酸拉链(bZIP)结构,是细胞抗氧化反应中的重要转录因子。它通过与其下游基因启动子区的抗氧化反应元件ARE结合,诱导抗氧化蛋白和Ⅱ相解毒酶的表达,在氧化应激和外源性有毒物质损伤的防御机制中发挥重要的作用。Nrf2/ARE信号通路是近几年抗氧化研究领域的热点,该通路在抗肿瘤、抗应激、抗凋亡、抗炎症反应、抗动脉粥样硬化以及神经保护等方面发挥着广泛的细胞保护功能。目前Nrf2/ARE通路已经成为抗癌化学疗法的新靶点,为癌症的治疗提供一条新途径。MicroRNAs(miRNAs)是一种长度约18-24个碱基大小的内源性非编码单链小分子RNA,它通过与靶mRNA的3’UTR碱基配对,通过抑制mRNA的翻译或直接使其降解,调控基因的表达。miRNA参与动植物许多复杂的生命过程,如生长发育、器官形成、细胞凋亡和细胞增殖。目前的研究表明,miRNA在肿瘤的发生发展中发挥着重要的调节作用,多数miRNA基因位于与肿瘤形成相关性脆弱基因位点。miRNA的异常表达与多种癌症的发生密切相关,并且作为癌基因和抑癌基因参与调控肿瘤细胞的生长、凋亡、侵袭和转移等。目的本研究旨在揭示microRNA在乳腺癌细胞中对Nrf2及其下游基因表达的影响,并且探究miR-140对乳腺癌细胞生长以及氧化应激的影响。方法我们首先利用生物信息学方法预测miR-140与Nrf2的结合位点,然后采用双荧光报告系统检测miR-140对Nrf23’UTR及启动子上的8×ARE荧光素酶报告基因活性的影响；同时以实时荧光定量PCR法和Western Bloting法检测过表达miR-140和加药刺激前后细胞中Nrf2及其下游基因的mRNA和蛋白的表达变化；最后,MTT法检测转染miR-140后,对于不同浓度H202处理的细胞,其生长能力及对氧化应激敏感性的变化。结果生物信息学结果显示,miR-140与Nrf23’UTR具有保守的相互结合区域,过表达miR-140能够显著抑制Nrf23’UTR和ARE荧光素酶报告基因的活性；不仅如此,我们还发现在过表达miR-140的对照组和加药组细胞中,Nrf2及其下游基因mRNA和蛋白水平均被明显抑制；最后,MTT实验结果显示转染miR-140细胞活力受到抑制,同时再使用不同浓度的H202刺激细胞后,细胞对氧化应激的敏感性增加。结论Nrf2是miR-140的一个新的靶基因,miR-140能够通过抑制Nrf2,进而抑制其下游一系列抗氧化基因的表达。