血清miRNA-21和let-7a在胃相关疾病中的表达

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实验目的研究血清中miRNA-21、let-7a浓度与对应组织中含量的相关性。同时研究胃癌患者术前及术后血清中miRNA-21、let-7a浓度的差异表达,以及血清miRNA-21、let-7a浓度在正常对照组、胃窦溃疡、胃窦炎性息肉、肠上皮化生及胃癌患者的差异表达。探讨血清中miRNA-21和let-7a在胃癌无创性诊断以及手术效果评定中的作用。对象与方法材料:收集29例未经放化疗胃癌患者术前及术后外周血、术中癌与癌旁组织,同期消化内镜中心25例正常体检人员、25例胃窦溃疡、18例胃窦炎性息肉以及23例肠上皮化生患者外周血以及镜下胃窦组织。所取标本经处理后放入-80℃冰箱保存。实验方法:使用组织microRNA提取纯化试剂盒及血清总RNA提取试剂盒分别从组织标本及血液标本中提取miRNAs与RNAs。使用Two Step Stemaim-it miR qRT-PCR Quantitation Kit(SYBR Green)与U6 Endogenous Control Kit (SYBR Green)对提取的样本进行反转录及荧光定量PCR,分别检测正常对照组、胃窦溃疡、胃窦炎性息肉、肠上皮化生以及胃癌患者血清样本及配对组织中miRNA-21和let-7a的表达。统计学分析:使用SPSS17.0软件对数据进行分析。结果1.血清中miRNA-21浓度与配对组织中表达量具有相关性,rs=0.826(P=0.000);血消中let-7a浓度与配对组织中发达量具有相关性,rs=0.889(P=0.000)。2.胃癌患者术后血清中miRNA-21浓度与术前相比显著降低,t=0.511(P=0.030);术后血清中let-7a浓度与术前相比显著升高,t=0.770(P=0.000)。3.五组血清中miRNA-21浓度比较,差异有统计学意义χ2=10.841(P=0.028),正常对照组血清中miRNA-21浓度与胃癌患者血清中miRNA-21比较,差异具有统计学意义Z=3.009(P<0.0125),正常对照组与胃窦溃疡、胃窦炎性息肉及肠上皮化生患者血清中miRNA-21浓度比较,Z分别为0.949,0.750,1.930(P>0.0125)差异无统计学意义。5组血清中let-7a浓度相比较,差异有统计学意义x2=26.460(P=0.000),正常对照组血清中let-7a浓度分别与肠上皮化生及胃癌患者比较,差异有统计学意义,Z分别为2.395,4.847(P<0.0125),正常对照组与胃窦溃疡及胃窦炎性息肉患者血清中let-7a比较,Z分别为1.188,1.362(P>0.0125)差异无统计学意义。结论1.血清中miRNA-21和let-7a含量和对应组织中的含量具有相关性,血清中miRNA-21和let-7a可随病情发生变化,这一现象提示血清中miRNA-21和let-7a在观察手术疗效时,可以联合其他基因组或蛋白质组成为一种新的有效的生物标记。2.正常对照组与胃癌患者血清miRNA-21含量相比差异有统计学意义,正常对照组与肠化组及胃癌组患者血清中let-7a含量相比差异有统计学意义。这一现象提示血清中miRNA-21和let-7a在诊断胃癌时,可以联合其他基因或蛋白质组成为一种新的有效的生物标记。3.正常组与胃良性病变组血清miRNA-21含量表达无差异,正常对照组与胃良性疾病患者血清let-7a含量表达无差异,这一现象提示miRNA-21、let-7a对于胃良性病变区分度不高,因此这两项指标在诊断胃良性病变时意义不大。
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