新城疫病毒对不同禽类成纤维细胞致病性的差异

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新城疫病毒自从1926年发现并分离到该病毒以来,该病毒至今还在世界各地流行和传播。虽然不同的毒株的毒力表现出很大的差异。但以往以为水禽和其它禽类通常抵抗力较强,即使强毒毒株感染也不出现症状。但近年来,新城疫病毒出现了某些新的致病特点,即出现了对水禽的致病性。本实验从细胞水平上研究新城疫病毒对不同禽类成纤维细胞致病性的差异。在实验过程中选择了两株毒株:鸡NDV(F48E8)和鹅NDV(ZJ/1/00/Go),禽类成纤维细胞有鸡胚成纤维细胞(CEF)、鹅胚成纤维细胞(GEF)和鸭胚成纤维细胞(DEF)。每种病毒分别作用于不同的禽类成纤维细胞,比较指标有:细胞开始接种病毒的时间、细胞开始出现病变的时间、细胞病变高峰期出现的时间、细胞单层完全破坏的时间、眼观细胞病变、细胞单层完全破坏后上清液血凝价。结果表明,F48E8对CEF的病变作用最为明显,在接种病毒后24小时就开始有病变产生,表现为细胞变圆、回缩,细胞之间的空隙增大,随后细胞之间有大量的空白区,合胞体数量不多,体积中等;F48E8对GEF和DEF的病变作用稍慢些, ZJ1对GEF的细胞病变最为明显,在接种病毒后24小时开始有病变产生,表现为细胞肿大、不规则、边界模糊,随后细胞之间拉网状结构比较明显,形成大量的合胞体,且合胞体呈现多形,体积大。可见,每一种病毒对长满单层的细胞所形成的细胞病变与病毒本身的特性有关。提取两株病毒的RNA,并做F基因的克隆测序,发现两株病毒的核苷酸序列同源性为80.1%,氨基酸序列同源性为90.7%,而且ZJ1的氨基酸位点有多个发生突变,这可能与鹅源毒株有较强的促细胞融合能力有关。有关NDV与不同细胞受体的关系及F蛋白在不同种源细胞中发挥的作用差别将是下一步研究的重点,这对于揭示NDV与受体的相互关系有着重要的指导意义。
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