癫痫作为全球性的精神疾病,影响超5000万人,并由于其造成的持续的脑部损伤还在困扰着患有癫痫的病人。目前已经发现了一系列能影响癫痫发病的基因,但仍需研究清楚其潜在的分子机制。由于约三分之一的癫痫患者对治疗癫痫的药物没有响应,所以寻找补充和替代疗法,特别是中医所用的传统草药治疗方法也是一种治疗癫痫的有效途径。用传统草药治疗癫痫在中医中早有记载,癫痫在中医又称癫疾、痫证,我国最早有关癫痫的文献记载在《黄帝内经·素问奇病论》中。但由于草药中过于复杂的化学成分以及中医论证的复杂性和经验论,其在癫痫治疗中的有效性得不到充分保证,因此急需系统性的开发适用于草药中天然化合物的开发筛选和机制研究。在本研究中,结合实验室开发的网络系统药理学研究与蛋白印迹实验,揭示了银杏叶中小分子化合物银杏内脂B对癫痫的治疗作用,通过网络系统药理学分析及实验验证,找到了其可能存在的新的作用机制。本文主要研究内容如下:Ⅰ.通过ADME筛选,从银杏叶中获取26中具有良好药代动力学特性的化合物;化合物-靶标网络分析表明,银杏叶的候选活性分子作用于297个靶蛋白,网络中的化合物或靶标均显示出多向药理学特性,表明银杏叶用于治疗疾病的多向药理学特性和协同作用。Ⅱ.疾病关联分析确定了银杏叶的144个靶标具有精神障碍治疗活性,这些靶标可以显著富集到101个通路,其中显著富集与神经系统相关的通路排在前列的是神经活性配体-受体相互作用途径,5-羟色胺能突触和c AMP信号传导,结合靶点在通路上的映射结果,揭示了银杏叶通过神经活性配体-受体相互作用、5-羟色胺能突触、多巴胺能突触三大信号通路发挥治疗效果。Ⅲ.发现GDF10通过TGF-β信号通路进入5-羟色胺能突触、多巴胺能突触这两个网络从而发挥其精神治疗作用的机制。因此进行进一步的实验验证,通过使用银杏内脂B对大鼠癫痫模型和体外SH-SY5Y细胞系给药,评估银杏叶和银杏内脂B的抗癫痫作用。综上所述,本研究围绕银杏叶活性小分子化合物的多功能系统网络进行了研究,从药效分子、药效靶点和疾病信号通路等角度系统的阐明银杏叶提取物在癫痫治疗过程中各化合物增效协同机制,为癫痫治疗和新药研发提供了一定的理论基础,也为传统中医药的现代化提供了一个可能的新方向。