真核细胞内细胞质膜与细胞器等膜状结构组成庞大的生物膜系统,系统间物质和信息交流构成细胞生命活动的基础。囊泡运输是真核细胞内物质运输的主要形式。囊泡运输过程分为四个基本步骤,出芽、转运、栓留以及融合,COG复合体参与栓留过程。COG复合体由8个亚基组成,与高尔基体结构、胞内运输和糖基化相关。目前,在哺乳动物和酵母中,COG复合体的研究较多,但在植物中相关研究较少。本研究以矮牵牛(Petunia hybrida)‘紫罗兰’为材料,沉默PhCOG8观察表型。接着构建亚细胞定位载体,利用酵母双杂筛选互作蛋白,构建BiFC载体进一步验证其与互作蛋白的关系。最后通过VIGS鉴定互作蛋白功能,观察植株的差异表型。主要结果如下。1.外界环境温度低于18℃时,矮牵牛PhCOG8沉默植株生长点受抑制,新叶畸形,后期逐渐萎蔫坏死。通过亚细胞定位发现PhCOG8蛋白位于细胞质和细胞膜上。2.酵母双杂筛选出8个互作蛋白PhVHA-d2、PhAt、PhVPE、PhMYB308、PhATGI8、PhSAM3、PhWrap53、PhERD3。酵母双杂一对一验证结果表明PhVHA-d2、PhAt、PhVPE、PhMYB308、PhATGI8与PhCOG8存在互作关系,PhSAM3存在自激活的现象,PhWrap53、PhERD3双杂验证与PhCOG8没有互作关系。3.BiFC实验中PhAt、PhVPE分别与PhCOG8导入原生质体观察到荧光,而PhVHA-d2、PhMYB308、PhATGI8、PhSAM3分别与PhCOG8导入原生质体没有观察到荧光。4.通过VIGS方法沉默PhVHA-d2、PhAt、PhVPE、PhMYB308、PhATGI8和PhSAM3,其中PhVHA-d2沉默植株有明显的差异表型,植株早期生长受抑制,茎尖生长点新叶畸形,逐渐萎蔫坏死,与PhCOG8沉默植株表型相似。PhSAM3沉默植株部分植株叶型窄小。