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L-苹果酸是三羧酸循环(TCA循环)及其支路乙醛酸循环的中间产物,在生物体代谢过程中处于一种枢纽位置。试验研究了苹果酸对罗非鱼生营养生理效应,旨在获得罗非鱼苹果酸的添加量,同时探讨苹果酸对罗非鱼的促生长机制,为苹果酸在罗非鱼饲料中的应用及酸化剂的配制提供理论基础,为酸化剂作为抗生素替代品的绿色环保饲料添加剂提供理论依据,也为其他鱼类饲料酸化剂研究提供重要参考。试验采用单因子浓度梯度法设计,以秘鲁鱼粉、肉粉、大豆粕和棉籽粕等原料配制成基础日粮,分别添加-苹果酸,制成苹果酸水平为0.0g/kg、0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg、4.0g/kg、8.0g/kg和16.0g/kg七组粗蛋白34.42%饲料,对630尾罗非鱼幼鱼(初始体重为31.76±0.04g)进行了56d生长试验。每组日粮组设置3个重复,每个重复30尾罗非鱼,饲养在容积0.38 m3(有效体积0.32 m3)的玻璃纤维水族缸中。饲养期间水温26～28℃,DO>6.0 mg/L,pH 6.5～7.0,氨氮<0.05 mg/L亚硝酸盐：0.009～0.020 mg/L。试验结束后,研究苹果酸对罗非鱼生长性能、形体、胃肠道营养(胃肠道结构,消化酶活性)、机体免疫力(肝胰脏结构,免疫和抗氧化指标)和肠道菌群的影响试验结果表明：1日粮苹果酸水平对罗非鱼饲料酸度的影响随着苹果酸添加量得提高,饲料中pH值和系酸力都呈下降趋势,在16.0g/kg组达到最低值。经统计分析,饲料系酸力和苹果酸添加水平具有很好的相关性。将苹果酸添加水平(x)与饲料系酸力(y)进行二次曲线回归分析可得,y=0.0259x2-0.857x+22.164,R2=0.9789。2日粮苹果酸水平对罗非鱼生长和形体指标的影响随着日粮苹果酸水平的提高,罗非鱼的增重率和特定增重率呈先增(0.0～1.0g/kg)后逐减(1.0～8.0g/kg),然后在16.0g/kg组的增重率突然又增加,达到最大值,16.0g/kg组较对照组分别提高了18.62%和8.68%；而饲料系数正好相反,在16g/kg组达到最低值,较对照组下降了15.67%。日粮添加苹果酸对罗非鱼形体指标(肥满度和内脏比)没有显著影响(P>0.05)。3日粮苹果酸水平对罗非鱼胃肠道消化酶活力的影响日粮添加苹果酸对罗非鱼消化酶有显著的影响(P<0.05)。随着日粮苹果酸水平的提高,罗非鱼胃蛋白酶活性也随着增强,在16g/kg组达到最大值；脂肪酶和淀粉酶呈先升高后降趋势,在1.0g/kg组达到最大值；胰蛋白酶活性加酸组显著低于对照组,但加酸组间差异不显著(P>0.05)。4日粮苹果酸水平对罗非鱼胃H+-K+-ATP酶活力的影响随着日粮苹果酸水平的提高,罗非鱼胃中H+-K+-ATP酶活力呈先下降后上升趋势,在2.0g/kg组达到最低值,16.0g/kg组达到最大值。5日粮苹果酸水平对罗非鱼抗氧化和免疫功能的影响血清中,丙二醛的含量随日粮苹果酸水平的上升呈先下降后上升至平衡趋势,在2.0g/kg组达到最低值,较对照组下降了20.64%。；溶菌酶活力呈先上升后下降趋势,在4.0g/kg组达到最大值。随着日粮苹果酸水平的从提高,罗非鱼肝胰脏SOD呈先增(0.0～1.0g/kg)后逐减(1.0～8.0g/kg)趋势,2.0g/kg～8g/kg组差异不显著,当苹果酸添加16g/kg时,SOD达到最大值。6日粮苹果酸水平对罗非鱼苹果酸穿梭重要酶(苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶)活力的影响随着日粮苹果酸水平的提高,罗非鱼肝胰脏中苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶活力都呈先下降后上升趋势(0.0g/kg～8.0g/kg),当苹果酸添加水平达到16.0g/kg时,苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶活力达到最大值,较对照组分别提高了98.96%和42.20%。7日粮苹果酸水平对罗非鱼胃肠道,肝胰脏组织结构的影响随着日粮苹果酸添加量的提高,罗非鱼胃肠道组织、肝胰脏组织并没有出现病变。对胃组织进行光学显微和扫描电镜观察,随着日粮苹果酸水平的提高,胃粘膜层的厚度呈先增后降趋势,胃腺开口增大,通透性增加,并在高浓度组出现一层白色的膜。对肠组织进行光学显微观察,随着苹果酸水平的提高,肠绒毛长度呈先增加后下降趋势,在1.0g/kg和2.0g/kg组达到最大值。对肝胰脏组织的观察表明,肝胰脏结构保持完整。8日粮苹果酸水平对罗非鱼肠道菌群的影响肠道双歧杆菌属数量随着日粮水平的提高而增加,而假单胞菌属与双歧杆菌正好相反,呈下降趋势；大肠杆菌属数量随着日粮苹果酸水平的提高(0.0g/kg～8.0g/kg)呈先增后降趋势,在16.0g/kg又突然增加；气单胞杆菌数量随着日粮增加在低浓度(0.0g/kg～2.0g/kg)没显著差异,在4.0g/kg突然增加,达到最大值,在4.0g/kg～16.0g/kg呈等比下降趋势。综上,得到以下结论：1适宜日粮苹果酸水平能显著提高罗非鱼的增重率、特定生长率,降低饲料系数。2适宜日粮苹果酸水平可以提高罗非鱼胃肠道消化酶活性,提高饲料的消化率。3适宜苹果酸水平可以提高罗非鱼抗氧化和免疫功能。4适宜的苹果酸水平能增加肠绒毛长度和胃粘膜厚度,并保持肝胰脏结构不受损坏。5添加苹果酸对罗非鱼肠道菌群有显著的影响,添加适宜的苹果酸可以提高肠道有益菌的数量。6罗非鱼饲料中L-苹果酸的适宜添加水平为1.0g/kg。