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二恶英类化学物质在环境中广泛存在，不易降解，毒性高且易于生物富集／生物放大，能对环境、人和动物造成严重影响。1999年比利时肉鸡二恶英污染事件后，DLCs引起国际社会的广泛关注。二恶英分析是现代分析的一个重点和难点。目前二恶英类物质主要的检测方法有化学法（色谱法）、免疫法和生物法三大类。色谱法是目前国际通用的标准方法。但到目前为止，还没有一种能高通量、低成本进行二恶英检测的方法。本研究的目的是利用二恶英类化学物质的毒理机制，建立一种能满足饲料及畜产品中二恶英监测的高通量、低成本需要的方法。本研究构建了一个受二恶英应答元件（DRE）调控的，以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）作为报告基因的表达质粒，将该质粒转染大鼠肝细胞瘤H4ⅡE，筛选稳定转染细胞株。二恶英类化学物质与该稳定转染细胞株接触可诱导EGFP呈剂量依赖性的表达，通过检测EGFP含量即可反映二恶英类化学物质的量。本研究内容分两部分：一．将载体质粒pEGFP-N1的CMV启动子去除后，用T4 DNA连接酶分步连接上MMTV启动子和DRE片段，构成以EGFP为报告基因的，对二恶英起特异性应答的表达质粒pGMD1.1。重组质粒瞬时转染大鼠肝细胞瘤H4UE，以TCDD诱导绿色荧光蛋白表达，以DMSO诱导作阴性对照，结果表明TCDD诱导绿色荧光蛋白表达为DMSO诱导的表达量高出约10倍左右，表明重组质粒构建成功。二．将重组质粒pGMD1.1稳定转染大鼠肝细胞瘤H4ⅡE，经过4周培养筛选，得到1株具有TCDD较强诱导活性的重组细胞系H4EG.1b2。然后对该细胞株的检测条件进行了优化。将H4EG1b2细胞每孔约150，000个加入黑色壁、透明底96孔培养板（Costar 3603）中，37℃培养，33℃与TCDD（待测物）共孵育进行荧光检测。制定了TCDD诱导H4EG1b2的标准曲线，确定该方法的最低检测限为1pM，EC50值为5pM，最大诱导剂量为500pM，线性范围为1～500pM。实验还对一些可能对二恶英检测产生干扰的物质进行了研究。结果表明，PCB、雌激素及DDT等物质能够对二恶英检测产生影响，因此在样品处理时应除去这些物质。该分析方法和以荧光素酶基因为报告基因的细胞分析方法比较，不但具有相同的灵敏度和特异性，而且更简单、快速、便宜，还可以实时检测，从而可满足饲料及畜产品二恶英监测的高通量、低成本需要。