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在生命活动正常进行的过程中,以泛素化为代表的多种蛋白质翻译后修饰作用必不可少。泛素化修饰不仅可以参与诸如NF-κ B、MAPKs等多条信号通路的激活,同时在某些情况下也可使靶蛋白被蛋白酶体降解。同时,Neddylation这种类泛素化修饰作用与泛素化修饰之间存有大量的相似性,也被报道在多种生命活动的调节中发挥作用。肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)可发生泛素化修饰从而在包括白介素-1受体和Toll样受体所介导的下游信号通路NF-κ B、MAPKs和IRF中发挥作用,其功能的正常发挥是多种生命活动正常进行的必要条件之一。但TRAF6能否发生Neddylation这一类泛素化修饰还不得而知。因此,我们在HEK293T细胞中超表达TRAF6和NEDD8这一 Neddylation发生所必须的小分子蛋白,通过免疫沉淀技术发现TRAF6的确可发生Neddylation修饰作用,并随着表达的NEDD8量的提高,TRAF6被Neddylation修饰的现象愈发明显。在细胞中加入Neddylation特异性的抑制剂MLN4924能明显抑制这一现象的产生,也从另一个角度证实了我们的猜想。此外,鉴于泛素化和Neddylation这两种修饰作用之间的相似性,我们发现TRAF6的Neddylation会对其自身泛素化起到一定的促进作用,而其泛素化对于Neddylation的发生则并没有明显的影响。同时,通过构建不同长度的TRAF6截短形式,我们发现,TRAF6的氨基酸序列上可发生泛素化修饰的第124位赖氨酸同样也在Neddylation修饰过程中发挥作用。但其泛素化活性位点第70位半胱氨酸则并不起作用。另外,通过碱性磷酸酶实验对NF-κB/AP-1/ISRE几种转录因子的筛选,我们发现TRAF6的Neddylation特异性地抑制IRF信号通路的激活,但对NF-κ B信号通路起到一定程度的激活作用,而对AP-1并没有明显的影响。并且,在双链RNA类似物Poly(I:C)诱发的炎症反应中,TRAF6的Neddylation同样可以在促进NF-κ B信号通路的同时抑制IRF信号通路,起到信号分流的作用。综上所述,我们的研究证明,除了泛素化修饰之外,TRAF6确实可以发生Neddylation这种类泛素化修饰作用,并且这一修饰作用能促进TRAF6自身泛素化的发生。在TRAF6所参与的多条信号通路的激活过程中,Neddylation的发生能在促进NF-κ B信号通路的同时抑制IRF信号通路。本论文首次发现了TRAF6可以发生Neddylation这种类泛素化修饰作用并阐述了其对于TRAF6参与的多条信号通路的不同调节作用,为以后研究TRAF6及Neddylation参与的信号通路提供了新的思路。