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目的通过RNA干扰单独和联合沉默肝癌SMMC-7721细胞的uPAR(纤溶酶原激活物受体)和CathepsinB(组织蛋白酶B),研究其对肝癌细胞迁移、细胞周期阻滞以及Integrinα6(整合素α 6)、MMP-9(基质金属蛋白酶-9)、ERK(细胞外信号调节激酶)、PI3K(磷脂酰肌醇-3-羟激酶)通路的信号影响,进一步探讨肝癌的靶向治疗,为肝癌治疗的新策略提供理论依据。方法培养肝癌SMMC-7721细胞、用荧光标记的siRNA转染细胞后观察转染效率。用uPAR, Cathepsin B靶向siRNA沉默SMMC-7721细胞。将肝癌细胞分成5组：空白对照组、阴性对照组、uPAR-siRNA转染组、Cathepsin B-siRNA转染组、uPAR-siRNA/Cathepsin B-siRNA联合转染组；用流式细胞术分析细胞周期；用细胞划痕实验检测癌细胞迁移能力；用RT-qPCR法检测肝癌细胞mmp-9(基质金属蛋白酶)、integrinα6(整合素α 6)基因表达；用Western blot法检测肝癌细胞t-ERK, p-ERK, t-PI3K, p-PI3K, integrinα6蛋白表达。结果：1.用低浓度荧光标记的uPAR, Cathepsin B靶向siRNA转染7721细胞。24小时后在倒置荧光显微镜下观察,细胞转染效率在85%以上,细胞状态良好。2.细胞划痕实验检测细胞迁移能力。用uPAR, Cathepsin B靶向siRNA沉默7721细胞,在0、12、24、36、48小时分5个时间点观察记录。与对照组相比,实验组肝癌细胞迁移能力明显下降,其中联合沉默组下降效果最为明显(P<0.05)。3.流式细胞技术检测细胞周期。转染48小时后,与对照组相比,实验组肝癌细胞GO/G1期(合成前期)细胞数明显增加,其中联合沉默组增加最为明显(P>0.05)。4.实时荧光定量PCR法检测integrin a 6及MMP-9 mRNA表达水平。转染48小时后与对照组相比,实验组integrin a 6及MMP-9 mRNA表达水平均明显下降,其中联合沉默组下降最为明显(P<0.05)。5.WB实验分别检测各组integrin a6、PI3K, ERK蛋白表达量。转染48小时后,与对照组相比,实验组integrin a 6、p-PI3K、p-ERK明显下降,其中联合沉默组增加最为明显(P>0.05)。结论：RNAi联合沉默uPAR和CathepsinB基因可以降低肝癌细胞的迁移能力,诱导细胞GO/G1期阻滞,主要机制可能为通过抑制Integrin a 6、 MMP-9及PI3K、ERK通路的表达而发挥作用。且联合沉默效果比单独沉默更为有效。