降血压益生菌的筛选及安全性评价研究

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血管紧张素转化酶(Angiotensin-converting enzyme, ACE)在人体内的肾素-血管紧张素系统和激肽-激肽释放酶系统中对血压调节起着重要的作用。通过抑制ACE活性以及拮抗血管紧张素的作用已成为抗高血压药物开发的关键。其中,来源于食物的ACE抑制肽具有安全性高、副作用小的特点,目前已成为研究的热点。益生菌在生长过程中分泌的蛋白酶可以将一些乳蛋白水解成小分子肽,其中就包括ACE抑制肽,可达到预防及安全降压的目的。本课题通过对原有储备和采集的菌种进行功能性筛选及生物特性评价,确定其生理生化、代谢、遗传特征,并通过体内功能性实验及安全性评价研究,得到性状优良、安全稳定的菌株。本课题研究结果表明:1、通过耐酸耐胆盐实验从72株菌株中筛选出36株供试菌株,从中筛选出5株具有较强ACE抑制活性的菌株(菌株编号为DM9028、DM9007、DM9057、DM9073、DM9053, ACE抑制率分别为80.69%、77.55%、73.91%、72.19%、67.39%)。2、通过耐胃肠道酶、抑菌和耐药能力的评价,及对人结肠腺癌细胞HT-29粘附能力的考察,确定菌株DM9057为进一步研究的实验菌株。3、通过微生物学、生理生化及16S rDNA序列分析,DM9057具有明显的乳酸菌生物特征。4、通过急性毒性和易位实验表明,实验菌株DM9057对小鼠体征、生理机能及组织器官无明显不良反应,并未观察到易位现象,可初步确定菌株的安全性。5、通过原发性高血压大鼠(SHR)体内实验表明,实验菌株DM9057对SHR具有显著的降压效果,但对体重及血清中的总胆固醇、甘油三酯、高密脂蛋白无显著性影响。6、通过实验菌株DM9057的生长发酵特性研究结果表明,以酪氨酸为指标的蛋白水解活力作为发酵乳ACE抑制率质量标示指标的可行性,并证明发酵乳经4℃低温冷藏不宜超过11d,有助于其功能指标、感官指标的稳定性。本课题是国家高新技术研究发展计划(863计划)专题课题《益生菌定向筛选关键技术及产品开发研究》(2007AA10Z356)的重要工作内容,本研究成果为功能性益生菌的筛选、遗传特征的确定及生物功能的评价建立了一套研究和开发的创新性模式和科学思维体系,为进一步开发包括降血压功能在内的益生菌及深入研究其益生作用的机制奠定了基础。
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