长链非编码RNA H19基因多态性与早发冠心病遗传易感性研究

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背景:冠状动脉性疾病,简称冠心病(coronary artery disease,CAD),是严重危害人类健康的常见病;随着社会发展及人口老龄化,其发病率及死亡率逐年上升,并呈现年轻化趋势。早发冠心病一般定义为发病年龄于男性小于55岁、或于女性小于65岁的一类特殊类型冠心病。早发冠心病患者相对于晚发冠心病患者而言,其临床症状进展更快、预后更差。目前已经明确,遗传因素是早发冠心病发病最重要的危险因素之一,但一些新的冠心病相关基因与早发冠心病的关系尚不明确。H19基因全长2.5kb,位于人11号染色体短臂第1区第5带第5亚带,共包括5个外显子及4个内含子,因缺乏明显的开放阅读框,不具备蛋白编码功能,故称为长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)。H19同时是最早被鉴定的印记基因之一,表现为父性印迹而母性等位基因表达。H19基因高丰度表达于胚胎发育中期,出生后其表达量则显著降低,仅在心肌及骨骼肌中有一定的表达。已经证实,H19表达在动脉粥样硬化患者及大鼠模型斑块组织中均有明显升高,并且发现,H19基因多态性与多种早发冠心病危险因素如肥胖、出生体重、高血压等密切相关,提示H19可能与早发冠心病的发生发展密切相关,但关于H19基因多态性与早发冠心病的关系尚未有文献报道。本课题旨在通过病例-对照实验研究探讨h19基因多态性与早发冠心病风险的关系,为早发冠心病的早期预防、早期发现、鉴别高危人群提供一种新的遗传学标志。方法:本研究入组213例在江苏省人民医院冠脉造影阳性(至少1支冠状动脉直径狭窄>50%)、且年龄符合男性小于55岁,女性小于65岁的病人为早发冠心病组,同时选取同时期于体检中心健康体检、且性别年龄均匹配的776例健康体检者为对照组。所有入选者均测量血压、身高、体重、空腹血糖、血脂水平,并采用wizard®genomicdnapurification试剂盒(promegacorporation,madison,wi,usa)提取外周血基因组dna应用taqmansnpgenotypingassay试剂盒对h19基因多态性位点(rs2067051,rs2251375,rs217727,rs4929984)进行分型检测。结果:多元logistic回归分析显示,h19rs217727多态性与早发冠心病发病独立相关(p<0.01),tt型纯合子患早发冠心病的风险是cc纯合基因型的3倍,(or=3.00,95%ci=1.74-5.17);而t等位基因携带者患早发冠心病的风险是c等位基因携带者的2.66倍(or=2.66,ci=1.62-4.36)。分层分析显示,t等位基因携带者的早发冠心病发病风险在女性及不吸烟人群中更加明显。进一步将早发冠心病患者按病变血管支数分为单支、双支、三支病变三个亚组分析显示,尽管基因型频率在三组间无明显差异,rs217727位点t等位基因携带者冠脉gensini评分明显高于C等位基因携带者(P=0.008),提示H19基因rs217727位点可能与冠脉病变严重程度相关。结论本课题首次发现H19基因多态性位点rs217727与早发冠心病发病风险及严重程度相关,T等位基因可能是早发冠心病的遗传易感因素,本研究结果有望为CAD的早期诊断和干预提供新的遗传学标志物。
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