【摘 要】
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目的:分离编码刚地弓形虫ZS2分离株微线体蛋白1(microne-me protein 1 MIC1)及致密颗粒蛋白8(dense granules protein 8 GRA8)的基因,进行基因序列测定及序列分析;分别克隆于
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目的:分离编码刚地弓形虫ZS2分离株微线体蛋白1(microne-me protein 1 MIC1)及致密颗粒蛋白8(dense granules protein 8 GRA8)的基因,进行基因序列测定及序列分析;分别克隆于原核或真核表达载体,并进行了基因表达和表达产物的鉴定;构建致密颗粒蛋白8 DNA疫苗并诱导小鼠保护性免疫,为核酸疫苗在弓形虫病预防研究中提供候选抗原及实验依据.结论:(1)特异性扩增出弓形虫ZS2株MIC1539-1009bp间471bp基因片段及GRA8全长基因,该基因与弓形虫RH株相应基因序列高度同源.(2)构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-GRA8,GRA8基因能在小鼠肌细胞中稳定存在与表达.(3)核酸疫苗pcDNA3.1(+)-GRA8可诱导免疫小鼠延长抗弓形虫攻击感染的存活时间.(4)构建原核表达载体pWR450-1-MIC1,该载体可在大肠杆菌中表达出具有抗原性的MIC1融合蛋白.
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