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目的:从大鼠卵巢GC功能入手，探讨补肾活血方改善卵巢储备功能的作用机制，为补肾活血方在临床上的推广应用提供理论依据。
方法:在体实验:选用12周龄性成熟SD雌性大鼠，随机分为6组，分别为空白组，GTW模型组，补肾活血方低、中、高剂量组及对照药六味地黄汤组。观察卵巢指数，卵巢GC形态，血清中E2、FSH水平(放免法)及GC凋亡因子Bcl-2、Bax蛋白，Caspase-3蛋白酶的表达(免疫组化法)；离体实验:建立大鼠卵巢GC培养体系，在GTW干预下，加入补肾活血方及补肾活血方含药血清，培养24h后，检测GC培养液中E2的水平(化学发光法)及GC的生长情况(MTT法)。
结果:在体实验结果显示:模型组与空白组比较:大鼠卵巢指数，血清E2、FSH水平，卵巢GC凋亡因子Bcl-2、Bax蛋白及Caspase-3蛋白酶的表达均有差异(p<0.05或p<0.01)；模型组与补肾活血方中、高剂量组，对照药六味地黄汤组比较:大鼠卵巢指数，血清E2、FSH水平，卵巢GC凋亡因子Bcl-2、Bax蛋白及Caspase-3蛋白酶的表达均有差异性(p<0.05或p<0.01或p<0.001)；模型组与补肾活血方低剂量组比较:血清FSH水平，卵巢GC凋亡因子Caspase-3蛋白酶的表达均有差异性(p<0.05或p<0.001)，大鼠卵巢指数，血清E2水平，卵巢GC凋亡因子Bcl-2、Bax蛋白的表达均无统计学意义；补肾活血方高剂量组与对照药六味地黄汤组比较:血清FSH水平有差异(p<0.05)，大鼠卵巢指数，血清E2水平，卵巢GC凋亡因子Bcl-2.、Bax蛋白及Caspase-3蛋白酶的表达均无统计学意义(p>0.05)。
离体实验结果显示:GTW组与空白组、空白含药血清组比较:GC培养液E2水平，OD值均有显著性差异(p<0.001)；GTW组与补肾活血方中剂量组比较:OD值有差异(p<0.05)，GC培养液E2水平无差异(p>0.05)；GTW组与补肾活血方高剂量组比较:GC培养液E2水平，OD值均有差异(p<0.05或p<0.001)；GTW组与补肾活血方中、高含药血清剂量组比较:GC培养液E2水平，OD值均有差异(p<0.05或p<0.01)。
结论:
1.补肾活血方可上调卵巢GC凋亡因子Bcl-2蛋白表达，下调Bax、Caspase-3蛋白表达，从而升高血清中E2水平，降低FSH水平，改善卵巢GC功能，表明通过抑制卵巢GC凋亡，减少卵泡过度闭锁可能是补肾活血方改善卵巢储备功能的作用机制之一。
2.补肾活血方(补肾活血法)和六味地黄汤(补肾法)均能抑制DOS模型大鼠卵巢GC功能下降，抑制卵巢GC的凋亡，反映出补肾法的确是中医治疗DOS的基础。但补肾活血方在下调血清FSH水平上，优于单纯补肾中药六味地黄汤，提示补肾活血方可能对影响卵巢功能的其它因素存在着干预作用。
3.GTW(50mg/kg/d连续灌胃14天)致DOS模型大鼠，卵巢组织病理改变，内分泌甾体激素紊乱，卵巢GC凋亡及卵泡闭锁增加，模型的复制得以证实，是较为稳定的、可重复的DOS动物模型。
4.GTW可以抑制体外培养卵巢GC的生长，分泌E2的水平下降。补肾活血方及补肾活血方给药血清均能在一定范围内拮抗GTW对体外大鼠卵巢GC的损伤，促进GC的生长及E2的生成。提示GTW可作为体外卵巢GC培养体系的病理因素，在细胞水平为深入研究中医药改善卵巢功能的机制提供便捷的方法。