脐带间充质干细胞抑制异种移植物抗宿主病的机制研究

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[目的]研究脐带间充质干细胞(MSC)的免疫调节作用。[方法]建立贴块法分离培养脐带MSC的方法,对细胞的一般形态、免疫表型和分化能力进行鉴定;建立NOD/SCID小鼠的异种移植物抗宿主病(X-GVHD)模型,给予模型小鼠尾静脉共输注MSC,观察输注后小鼠的体重、血象和病理改变确定MSC抑制X-GVHD的效果,并在此基础上对MSC抑制X-GVHD的机制作进一步探讨。[结果]1.成功采用贴块法分离培养的脐带MSC。从脐带组织周围爬出的短梭形的细胞是一群非内皮(CD31),非造血(CD45和CD34),仅表达一些细胞黏附分子(CD105,CD44,CD29,CD73)的干细胞群体。它表达HLA-ABC和PD-L1,不表达CD80、CD86和HLA-DR,经诱导能向脂肪和成骨细胞分化。2.应用脐血单个核细胞尾静脉输注建立NOD/SCID小鼠的X-GVHD模型,发现MSC共输注明显减轻X-GVHD症状(体重减轻、弓背、腹泻等),改善靶器官(肝脏、肾脏、脾脏和肺脏)的病理损伤。MSC输注虽然降低了骨髓、脾脏和周血中人源细胞的植入(p<0.05),但明显抑制了骨髓、脾脏和周血中人T细胞的增殖(p<0.05),提高了CD4~+/CD8~+T细胞比值。3.树突状细胞和T细胞是GVHD的效应细胞。MSC下调单核细胞诱导的树突状细胞成熟标志CD83,CD86,HLA-DR的表达,减少IL-12p70的分泌,抑制树突状细胞对T细胞的特异性细胞毒活性(p<0.05)。在特异性抗原刺激下,脐带MSC影响T细胞的细胞周期;上调活化Th细胞的比例,下调活化Tc细胞的比例,上调活化Th/Tc比值;抑制T细胞及其亚群Th和Tc细胞的增殖;上调T细胞FoxP3基因的表达;促进细胞因子TGF-β1和IL-6的分泌,抑制细胞因子IL-10的分泌(p<0.05)。细胞接触在脐带MSC与T细胞的相互作用不起主要作用。[结论]贴块法获得的脐带MSC具有免疫调节作用,能抑制X-GVHD,可能是通过抑制树突状细胞的成熟,抑制T细胞及亚群的增殖,上调Th细胞的活化,下调Tc细胞的活化,上调调节T细胞的表达,分泌抑制性细胞因子来发挥作用的。
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