高效液相色谱法是采用小粒径颗粒为色谱柱填料，不同极性溶液为流动相，高压泵为输液系统，利用化合物在两相之间的分配系数差异进行分离的分析技术。因其分离能力强，灵敏度高和自动化操作程度高等特点，在化学、生物、制药和环境等领域中具有广泛的应用。作为核心部件，硅胶基质色谱固定相具有耐高压、高柱效、易修饰等特点，在色谱领域的应用中占据绝对优势地位。但是，现有商品硅胶基质填料的制备过程复杂、水热稳定性差、表面残留硅羟基易引起碱性化合物拖尾等缺点，限制了其在药物分析领域中的应用。
　　针对以上问题，本文的研究目标是以有机单官能团硅烷为单一硅源，开发节能环保的色谱填料制备工艺，并提供高稳定性和低硅羟基活性的色谱填料，以满足现代药物质量控制技术对高性能填料的需求。为此，采用甲基三甲氧基硅烷为原料，经过单体水解、缩聚、碱热扩孔和煅烧等步骤，分别合成了多孔单分散聚甲基倍半硅氧烷(PMSQ)微球和二氧化硅微球。在此基础上，制备了一系列反相和混合模式色谱固定相。考察了微球的成球机理、孔结构控制、色谱性能、保留机理、功能化及应用。主要内容如下：
　　以PMSQ微球为模板，制备单分散多孔二氧化硅微球色谱填料。以甲基三甲氧基硅烷为前躯体，利用水解缩聚法制备了多孔单分散PMSQ模板微球，600℃煅烧除去有机成分，即可得到单分散多孔二氧化硅微球。微球粒径在3-10μm，比表面积在300-500m2g-1，孔径在3-13nm范围内连续可调。所制备的二氧化硅微球，不经筛分可直接用作色谱固定相。采用浸渍-气固相反应法对硅胶微球进行修饰，制备了十八烷基(C18)、磺酸基(SO3H)和十八烷基/磺酸基混合模式(C18/SO3H)三种色谱固定相。其中C18反相柱的色谱性能与国外著名商品填料相当，有望成为国际市场上色谱填料产品的有力竞争者；C18/SO3H混合模式色谱固定相可用于复方药物中多种成分的同时分离。该方法制备工艺简单，过程节能环保，原料价廉易得，单体转化率高，极大的降低了硅胶微球的生产成本，具有显著的竞争优势。
　　PMSQ微球作为反相色谱固定相用于碱性药物分离。除了作为模板，PMSQ微球也可以不经修饰，直接用作色谱填料。由于表面富含甲基，PMSQ是天然的反相色谱固定相。不同于无机硅胶，有机硅胶表面的硅羟基大部分被甲基取代，具有良好的反相色谱性能、较低的硅羟基活性、高的耐碱稳定性。通过对碱性化合物在PMSQ和甲基(C1)键合硅胶色谱固定相上保留行为的比较，表明前者的保留机理为疏水相互作用。因此，碱性化合物的峰型对称，拖尾因子小。而后者的保留机理为疏水和静电相互作用同时发生的协同效应，导致碱性化合物的保留增强，峰拖尾严重，与在其他硅胶基质反相色谱固定相上所观察到的现象一致。
　　PMSQ的氨基衍生化，制备反相/离子交换混合模式色谱填料并应用于复方药物分离。采用单体共聚法合成了可衍生化的乙烯基、氯丙基和巯丙基功能化PMSQ微球，并对微球进行了表征及色谱评价。不同链长官能团的引入增加了填料的疏水性，同样具有低的硅羟基活性，更适合应用于碱性化合物的分离。在此基础上，利用“巯基-乙烯基”点击化学对巯丙基功能化PMSQ微球进行衍生化，制备得到了氨基衍生化的反相/离子交换混合模式色谱固定相。由于微球存在甲基和氨基基团，对酸性药物的保留显出反相、离子交换和反相/离子交换多模式作用，可同时分离含酸性药物复方制剂中的多种成分。