阿瑞吡坦是一种具有全新机制的化疗止吐药物-神经激肽-1受体阻断剂,(R)-3,5-双三氟甲基苯乙醇((R)-BTPE)是其合成的关键手性中间体。采用精馏与柱层析法将产物(R)-BTPE与未完全反应的底物3,5-双三氟甲基苯乙酮(BTAP)进行分离,并结合Aspen Plus软件对精馏工艺进行工业化模拟优化,最终得到高纯度高收率产物(R)-BTPE。(R)-3-羟基丁酸乙酯((R)-EHB)是合成β-内酰胺酶抑制剂的关键手性中间体,采用重组工程菌的固定化细胞将乙酰乙酸乙酯(EAA)不对称还原得到(R)-EHB,并对固定化细胞的制备方法和反应条件进行优化。首先,利用精馏实验与模拟相结合的方式将(R)-BTPE与BTAP进行分离。实验与模拟数据偏差小于9%,证明Aspen Plus软件模拟对该体系分离的可行性。确定最优工业化分离模拟设计参数:回流比3.5,理论塔板数18块,进料位置第7块,采出与进料比0.8,最终得到纯度为99.6%,收率为99.4%的BTAP和纯度为97.6%,收率为98.1%的(R)-BTPE。随后,采用硅胶柱层析法将生物转化生成(R)-BTPE的萃取液进行提纯,最终得到高纯度高收率的(R)–BTPE。优化后结果如下:洗脱剂石油醚/二氯甲烷4:1,硅胶目数200-300目,上样量(g/mg)为1:5.5,洗脱速度为12s/mL。优化后得99.8%纯度,回收率为98.8%的BTAP和纯度为99.8%,回收率为96.8%的(R)-BTPE。最后,采用固定化细胞制备(R)-EHB。优化结果如下:利用海藻酸钙固定化重组工程菌细胞,缓冲液为pH值为12的甘氨酸-NaOH(50mM),菌体包埋量0.4g/mL,氯化钙浓度4%,海藻酸钠浓度3%,最优条件下产率92.8%,与游离细胞相比具有良好的温度适应性,反应3批次后仍保持23.2%酶活性,而游离细胞仅可反应一次。