细菌生物被膜的形成是许多临床疾病慢性反复感染的根源。大肠杆菌Nissle1917(EcN)是一种肠道益生菌,可以在肠道中定殖,抑制肠道致病菌繁殖。据报道,荚膜多糖,curli淀粉样蛋白以及类组蛋白类核结构蛋白(或类核蛋白,H-NS)对细菌的生物被膜形成都有一定的影响,但对EcN生物膜形成的影响尚不清楚,了解EcN生物膜形成的影响因素将有助于研究宿主对病原体的抵抗力,是减缓生物被膜形成的治疗学发展的重要理论基础。本课题通过λ-Red同源重组系统以及噬菌体P1的转导对EcN的进行敲除,构建类核蛋白H-NS缺失菌株EcNΔhnsA及curli菌毛缺失菌株EcNΔcsgA进行研究。结果显示,csgA对细菌生物被膜的形成及运动能力均无影响,kfiA和hnsA的缺失则会导致细菌生物被膜形成明显增多,并且hnsA突变株基本丧失运动能力;有研究表明,H-NS蛋白通过调节细菌鞭毛的相关基因来调节鞭毛的合成;细菌依靠鞭毛进行运动,鞭毛的缺失会导致细菌丧失运动能力,这有利于细菌附着于生物或非生物表面,从而有利于细菌生物被膜的形成,因此,hnsA的缺失导致EcN丧失运动能力,有利于其黏附于表面形成更多的生物被膜。但kfiA的缺失未改变细菌的运动能力,说明荚膜多糖不是通过运动性来影响EcN生物被膜的形成,具体的原因仍需进一步探究。综上,EcN的curli菌毛的缺失不影响其生物被膜的形成,荚膜多糖和H-NS蛋白的缺失导致EcN生物被膜形成增多,并且H-NS蛋白通过细菌的运动能力从而影响细菌生物被膜的形成,荚膜多糖影响EcN生物被膜的原因仍需进一步探究。