现代药物发现主要包括靶点的识别、先导化合物的发现、结构修饰和临床研究等阶段,而准确地确定活性分子的靶点成为影响整个研究过程中的重要环节之一。从天然药物白桦木中提取得到的白桦脂酸是一种具有诸多药理作用的天然药物分子,并且具有良好的抗肿瘤活性和很低的生物毒性。本课题工作主要运用光亲和标记蛋白质组学研究手段PAL-ABPP（Photoaffinity-based proteome profiling）的技术思路,合成一系列保持活性的白桦脂酸探针分子BA-1,BA-2,BA-3并且围绕这些小分子探针进行了多方面的生物学靶点识别和验证。对此部分展开的工作主要包括以下几部分:1.以白桦脂酸BA为母体化合物,对白桦脂酸重要的两个可修饰部位进行结构改造,分别合成了带有二氮杂环丙烯和四氮唑作为光亲和基团的光亲和分子探针BA-1/2,以及携带香豆素的荧光分子探针BA-3。2.对合成的三个探针BA-1/2/3分子进行了肿瘤细胞增殖抑制的实验,以母体药物分子白桦脂酸作为参照,确证分子探针的生物活性。实验结果证明,BA,BA-1/2/3对MCF-7细胞系的肿瘤增殖抑制实验中IC₅₀分别为10.5μM,11.6.μM,8.7μM,15.0μM。3.对探针分子BA-1/2开展细胞体内蛋白标记实验（Labeling）,证实了作为分子探针研究白桦脂酸体内靶标的有效性。通过上述分子探针开展细胞成像实验,确定药物分子在细胞内的亚结构分布。在确定了分子探针的生物活性之后,我们对亲和层析的样品进行生物质谱（LC-MS）的确证。除了对白桦脂酸的生物学靶点进行确证外,我们还针对目前上市的Bcl-2抑制剂ABT-199展开了生物学的毒副作用靶标确证工作,为理解这类药物分子在体内的作用机理与毒副作用产生机制提供基础。目前已经确证部分分子探针的有效性,生物质谱验证工作还在进行中。