原发性肝癌（Primary liver cancer,PLC）是我国最常见的恶性肿瘤之一,其发病隐匿,侵袭性高,进展快,病死率和复发率高。目前以肝切除术为主的外科治疗仍是PLC首选治疗方法,但仅有30%的患者可获得早期手术机会,而非手术治疗中血管介入治疗存在手术操作难度大等缺点;化疗药物副作用较大,且肝功能不全限制了化疗及放疗的应用,目前迫切需要一种高效的新型治疗方式。呼肠孤病毒是一种具有抗肿瘤作用的天然溶瘤病毒,具有选择性的在肿瘤细胞内复制和裂解肿瘤细胞的特性,并保留正常的组织细胞,其裂解肿瘤细胞的主要机制之一是诱导肿瘤细胞发生凋亡,禽呼肠孤病毒（Avian reovirus,ARV）属于呼肠孤病毒科的正呼肠孤病毒属,其具有典型的呼肠孤病毒形态,目前ARV抗肿瘤作用研究较少,其诱导人肝癌细胞（Hep G2细胞）凋亡的作用机制尚不明确。本次研究探讨ARVS1133诱导Hep G2细胞凋亡作用及其机制,并利用动物实验验证其生物安全性,为肝癌的新型高效治疗提供理论依据。研究方法本课题利用DAPI染色、LDH细胞毒性释放实验、MTT实验及流式细胞术等实验方法探究ARVS1133诱导Hep G2细胞发生的凋亡现象;通过正常小鼠攻毒实验验证ARVS1133的生物安全性,并研究ARVS1133在感染小鼠中的病毒动态分布及其组织嗜性;运用转录组学测序探讨ARVS1133抗肝癌作用中可能的明星分子及信号通路。结果（1）细胞病毒载量分析说明ARVS1133在Hep G2细胞中繁殖良好。（2）DAPI染色证实攻毒后Hep G2细胞发生了明显的核固缩和核碎裂,且Hep G2细胞凋亡数量随着攻毒时间延长而增多,并可见到Hep G2细胞融合形成的合胞体;LDH细胞毒性实验说明了与对照组相比,实验组Hep G2细胞凋亡在48hpi变化最显著（p<0.05）,MTT实验证实了ARVS1133对Hep G2细胞增殖有明显的抑制作用,与对照组细胞活性（100%）相比,实验组细胞活性于24hpi、48hpi、72hpi分别为91.2%、74.2%和66.5%;流式细胞术表明实验组Hep G2细胞的晚期凋亡率及总凋亡率随着攻毒时间延长呈明显上升趋势,而细胞存活率呈明显下降趋势。（3）小鼠攻毒实验实验组和对照组小鼠无发热、呼吸困难、厌食、体重减轻和行为障碍等临床症状,HE染色结果显示感染小鼠各器官无明显病变,证实了ARV S1133的生物安全性;小鼠各器官的病毒相对表达量峰值一般出现在3dpi和5dpi,且在肝脏、肾脏和脾脏中的相对表达量较高。（4）转录组学测序阐明了ARVS1133抗肝癌作用中的差异表达基因可能参与的信号通路主要有内质网蛋白加工通路、MAPK信号通路及细胞因子-细胞因子受体相互作用信号通路等,筛选到的明星分子包括FOS、IFIT2、CSF3、EGR2、HSPA6、ACE和AGTR1等。结论本课题证实了ARVS1133可诱导Hep G2细胞发生明显凋亡,对正常机体无明显致病性,且ARVS1133在机体的肝脏、肾脏和脾脏中相对表达量较高,其可能对肝脏、肾脏和脾脏系统肿瘤的治疗效果较好;内质网蛋白加工通路、MAPK信号通路和细胞因子-细胞因子受体相互作用信号通路等及FOS、IFIT2、CSF3、EGR2、HSPA6、ACE和AGTR1等明星分子可能参与了ARVS1133抗肝癌作用过程,并可进一步作为肝癌预后的生物学标记物,本课题阐明了ARVS1133抗肝癌作用及其可能机制,为肝癌的新型高效治疗提供了理论依据。