【摘 要】
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目的 为建立肿瘤细胞向腹膜转移的体外侵袭模型,建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。 方法 用0.1%胰酶+0.02%乙二胺四乙酸（EDTA）消化人大网膜组织,经去除红细胞后培养。在
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目的 为建立肿瘤细胞向腹膜转移的体外侵袭模型,建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。 方法 用0.1%胰酶+0.02%乙二胺四乙酸（EDTA）消化人大网膜组织,经去除红细胞后培养。在培养过程中以倒置显微镜观察细胞形态变化;HE染色观察细胞形态,并计算细胞纯度;扫描电子显微镜（SEM）观察细胞超微结构;免疫组织化学法鉴定细胞。四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察含不同成分的培养液对间皮细胞生长的促进作用。 结果 分离培养的细胞为多角形,汇合时呈铺路石样排列;培养细胞的纯度达96%以上;SEM下见细胞表面大量的微绒毛;免疫组化显示,细胞角蛋白、波形蛋白抗原阳性,白细胞CD45、第Ⅷ因子相关抗原阴性;所有被鉴定特征均符合间皮细胞的特点。氢化可的松（0.4%）、胰岛素（10μg/ml）对间皮细胞的生长有明显的促进作用。 结论 胰酶+EDTA消化法是一种简单、高效、重复性高的分离腹膜间皮细胞的方法。RPMI—1640、20%小牛血清、0.4%氢化可的松、10μg/ml胰岛素是培养间皮细胞有效且廉价的配方。
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