中介素对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

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目的观察中介素(intermedin,IMD)对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖和凋亡的影响。方法[1]体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7,随机将MCF-7细胞分为对照组、IMD组和受体阻断剂组。①对照组:培养液中不加任何刺激物;②IMD组:培养液中加入IMD,浓度为10-6mol/L;③受体阻断剂组:培养液中加入CGRP8-3(7CRLR/RAMP1受体拮抗剂)和AM22-52(CRLR/RAMP2和CRLR/RAMP3受体拮抗剂),浓度均为10-6mol/L。[2]各组分别孵育24小时后,采用免疫组化法测乳腺癌细胞中IMD蛋白的表达水平,MTT试验检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡。并检测各组细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、环氧化酶-2(COX-2)及抗凋亡蛋白-2(Bcl-2)的表达。结果(1)乳腺癌MCF-7细胞株中IMD的表达:免疫组化结果显示MCF-7细胞中IMD呈阳性表达。(2)IMD对MCF-7细胞增殖的影响:与对照组相比,MTT实验结果显示IMD可以促进细胞的增殖,而加入受体阻断剂可以抑制细胞的增殖(P<0.05)。(3)IMD对MCF-7细胞凋亡的影响:与对照组相比,流式细胞仪检测结果显示IMD组细胞的凋亡减少,而受体阻断剂组细胞的凋亡增加(P<0.05)。(4)IMD对各组细胞VEGF、COX-2、Bcl-2表达的影响:与对照组相比,IMD组VEGF、COX-2、Bcl-2的表达上调(p<0.05)。而受体阻断剂组VEGF、COX-2、Bcl-2的表达下调(P<0.05)。结论在体外培养的乳腺癌细胞中加入IMD可以使促血管生成相关因子VEGF、COX-2及抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,而加入受体阻断剂后可以抑制VEGF、COX-2、Bcl-2的表达,推测IMD可以通过影响VEGF、COX-2、Bcl-2的表达来促进人乳腺癌增殖和转移,提示阻断或下调IMD的表达,进而抑制或调控瘤内微血管系统的形成,促进肿瘤细胞的凋亡,有可能发挥抗肿瘤作用,为乳腺癌的治疗提供新策略。
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