【摘 要】
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目的 研究蛋白酶抑制剂对膜型TRAIL（Membrane TRAIL,mTRAIL）和可溶型TRAIL（Soluble TRAIL,sTRAIL）表达与功能的调节。方法:（1）采用辛酸法纯化FMU-TRAIL3单克隆抗体（Monoclonal antib
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目的 研究蛋白酶抑制剂对膜型TRAIL（Membrane TRAIL,mTRAIL）和可溶型TRAIL（Soluble TRAIL,sTRAIL）表达与功能的调节。方法:（1）采用辛酸法纯化FMU-TRAIL3单克隆抗体（Monoclonal antibody,mAb）并用SDS-PAGE鉴定。采用间接免疫荧光染色及流式细胞术检测mTRAIL的分布;用免疫沉淀及免疫印迹方法鉴定mAb对重组TRAIL（Recombinant TRAIL,rTRAIL）和细胞裂解液中TRAIL分子的识别。应用凋亡检测、51Cr释放实验鉴定FMU-TRAIL3 mAb的中和活性。（2）以不同蛋白酶抑制剂处理Jurkat、Daudi和Colo205细胞,采用间接免疫荧光染色及流式细胞术分析蛋白酶抑制剂对mTRAIL表达的影响。用RT-PCR法分析Jurkat、Daudi和Colo205细胞内ADAM10（Adisintegrin and a metollaprotease, ADAM10）和ADAM17基因的表达。（3）分别用PMA和PHA刺激Jurkat细胞不同时间,有的实验加入金属蛋白酶抑制剂1,10-phenanthroline或ADAM抑制剂TAPI-1（TNF-αprotease inhibitor-1）,用间接免疫荧光染色及流式细胞术分析mTRAIL表达;用ELISA检测细胞培养上清中sTRAIL水平。并观察IFN-α和金
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