研究背景：基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）家族是一簇Zn²⁺依赖性蛋白酶，其主要功能是降解细胞外基质（extracellularmatrix，ECM）成分。细胞外基质特别是基底膜的降解是肿瘤生长和浸润转移的重要一步，目前研究表明MMPs是降解基底膜的主要蛋白水解酶，特别是明胶酶（即MMP-2和MMP-9）在各种恶性肿瘤的浸润转移中起重要作用，并成为研究热点。肝癌是我国常见的恶性肿瘤，但是肝癌的生长和侵袭转移的分子生物学机制仍不完全清楚，为了阐明在肝癌发生发展过程中MMP-2和MMP-9的生物学作用，我们采用二乙基亚硝胺建立大鼠肝癌模型，在诱癌过程中应用基质金属蛋白酶抑制剂BB-94进行干预，检测治疗组和诱癌组肝组织中MMP-2和MMP-9的活性变化。目的：本实验旨在探讨MMP-2和MMP-9在肝癌形成过程中的动态变化，阐明明胶酶在肝癌形成过程中的作用，以及人工合成金属蛋白酶抑制剂BB-94对明胶酶和肝癌生长的影响。方法和结果 1、采用二乙基亚硝胺（DENA）诱癌建立大鼠肝癌模型。分别在癌前期（造模8周，12周）和癌变期（造模16周，20周）予BB-94腹腔注射进行治疗；结果显示20周治疗组大鼠的肝癌的癌结节平均面积较诱癌对照组明显减小（5.8±5.6mm² vs 13.2±12.4mm²，t=2.532，p＜0.05），说明BB-94能有效抑制肝癌的生长。 2、应用免疫组化方法检测肝癌形成过程中MMP-2和MMP-9的表达，结果显示MMP-2和MMP-9在正常肝细胞、肝星状细胞及肝癌细胞呈阳性染色，且两种酶的组织定位分布基本一致。 3、在诱癌过程中癌变发生的三个阶段6个时相采用明胶酶谱法测定肝组织中酸原及活性形式的MMP-2和MMP-9的表达情况。结果显示肝癌发生过程中基质金属蛋白酶呈持续升高的趋势，至早期癌变期及肿瘤演进期（16-24周）酶原形式MMP-2和MMP-9的表达呈一个较高的平台，且发现MMP-2的活性形式显著增加。应用BB-94治疗对MMP-2和MMP-9酶原无显著影响，而使MMP-2活性形式表达显著减少。 4、采用逆转录PCI｛对删’－Zm｛NA ＆达水平进行定显分析，诱恤过程中 MMP－2 mRNA变化情况和酶原形式 MMP－2变化趋势相一致。且m－94治疗对MMP－2 mRNA的表达无显著影响。结论：在整个肝癌形成过程中删卜2和删卜9呈持续上升趋势，在诱癌第16周随着肝癌形成可检测到活性形式的 MMP－2。BB－94可通过显著降低活性形式MMP－2的表达来抑制肝癌生长和侵袭转移；金属蛋白酶抑制剂BB干4可望为肿瘤病人辅助治疗提供新的途径。