背景和目的 胰腺癌是消化系统较常见的恶性肿瘤，其发病率呈明显上升趋势。胰腺癌起病隐匿，早期诊断困难，手术切除率低，对放化疗均不敏感，预后很差，五年生存率低于5％，被称为“癌中之王”。深入研究胰腺癌的分子生物学特性，开拓早期诊断和综合治疗的新举措，是改善其恶劣预后的关键。 肿瘤细胞突破细胞外基质和基底膜屏障以及肿瘤微血管生成，是肿瘤扩散转移的两个主要步骤。肝素酶(Heparanase，HPR)是一种内源性葡萄糖苷酸水解酶，能降解细胞外基质和基底膜屏障主要成分之一糖氨聚糖，破坏、改变细胞外基质和基底膜结构，促进肿瘤细胞侵袭、转移，还能诱发肿瘤血管生成反应。国外对肝素酶与胰腺癌关系有零星报道，国内尚未见类似报道。 血管内皮生长因子(vEGF)是迄今所发现的最重要的促血管生长因子，以特异的旁分泌方式作用于血管内皮细胞，诱导新生血管生成，显著增加微血管通透性。因此，vEGF逐渐成为肿瘤转移防治研究的一个新热点，已有vEGF抑制剂用于肿瘤治疗的研究报道。 本实验拟采用免疫组化技术检测胰腺癌中肝素酶和vEGF的表达情况，以及它们与肿瘤微血管生成、临床病理参数以及预后的关系，探讨两者在胰腺癌转移复发中的作用，为临床上判断胰腺癌的转移潜能和预后，寻找新的治疗方法奠定基础。 材料和方法 1．病例选择 实验组：1997年1月至2003年9月期间于浙江大学医学院附属邵逸夫医院经手术和病理证实为胰腺癌并行根治性手术的病例，共43例。 对照组：同期因胆总管囊肿和壶腹周围部腺瘤等良性疾病切除的正常胰腺组织共15例。 2．观测指标浙江大学硕士学位论文 分别观测实验组和对照组中肝素酶和vEGF的表达情况及微血管密度。3.免疫组化染色 所有的胰腺标本经冲%甲醛溶液固定，石蜡包埋和4om连续切片，采用免疫组化EnVision二步法检测肝素酶和vEGF的表达。操作步骤按照说明书进行，设立阳性对照和阴性对照。肝素酶和vEGF均以胞浆出现棕黄色为阳性细胞，分别对肝素酶和vEGF表达进行半定量分析。4.生存随访 并对43例胰腺癌病人术后生存期及转移复发情况进行随访。5.统计学处理 sPss统计软件作t检验、x’检验、双变量相关分析和K即lan一Meier法生存分析。 结果胰腺癌中HPR表达阳性率79%，对照组表达阴性，两者之间差异具有显著统计意义 (P<0.001)。胰腺癌中vEGF表达阳性率83.7%，对照组表达阳性率为13.3%，两者之间差异具有显著统计意义(P<0.001)。胰腺癌vEGF表达与HPR表达成正相关(:一0.535)。胰腺癌中HPR阴性表达组与中、高表达组之间MVD差异具有统计意义(P<0 .05)。vEGF阴性表达组与中、高表达组之间MVD差异具有显著统计意义(p<0.01)。胰腺癌中HPR和vEGF表达与MVD均成正相关，:分别为0.387和0.536。胰腺癌是否有浸润表现，其HPR表达的差异具有统计意义(P<0 .05)。胰腺癌中HPR表达与分化程度及有无浸润表现正相关，:分别为0.727和0.455。胰腺癌vEGF表达与分化程度及有无浸润表现成正相关，相关系数分别为0.554和0.427，与淋巴结转移成负相关(r=一0 .378)。胰腺癌中HPR表达阴性组术后平均生存期为(26.29士7.87)个月，阳性组为(15.62士2.47)个月，两者差异具有统计学意义(P<0.05)。HPR表达与术后生存期成负相关(r二一0.575)。在中位生存期内，HPR表达与否其复发转移差异有显著统计意义(P<0.001)。HPR表达与中位生存期内的复发发转移正相关，:一0.657(P<0.001)。vEGF表达与否其中位生存期内复发转移差异无统计意义，vEGF表达与复发转移也无相关性。浙江大学硕士学位论文 结论胰腺癌中肝素酶和vEGF表达明显升高。胰腺癌中肝素酶和vEGF表达与MVD、分化程度及有无浸润表现成正相关;与UICC分期无关:肝素酶表达还与复发转移成正相关，与术后生存期成负相关。胰腺癌中肝素酶表达与vEGF表达之间成正相关。