【摘 要】
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目的研究PHF5A在人胃正常上皮细胞系和胃癌细胞细胞系中的RNA和蛋白表达水平,以及对胃癌细胞MGC803增殖、迁移的影响和可能的机制。方法使用Western blot和q RT-PCR法检测PHF
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目的研究PHF5A在人胃正常上皮细胞系和胃癌细胞细胞系中的RNA和蛋白表达水平,以及对胃癌细胞MGC803增殖、迁移的影响和可能的机制。方法使用Western blot和q RT-PCR法检测PHF5A在胃正常上皮细胞GES-1和胃癌细胞系MGC803、MKN45、AGS中的m RNA和蛋白表达水平。用慢病毒为载体,转染PLKO.1空载质粒的MGC803细胞为阴性对照,转染PLKO.1-Sh PHF5A-Sh1和PLKO.1-Sh PHF5A-Sh2敲低质粒的MGC803细胞为作为实验组,经验证后,采用克隆形成、细胞增殖计数检测细胞增殖情况,采用划痕实验测细胞的体外迁移能力变化。用Western blot检测阴性对照组和实验组中NF-κB p65(核蛋白)、p-IκBα、IκBα、Cyclin D1蛋白表达情况。结果Western blot和q PCR结果显示胃癌细胞系MGC803、AGS、MKN45中PHF5A的m RNA和蛋白表达水平高于胃正常细胞系GES-1。在MGC803细胞中抑制PHF5A的表达后,与对照组相比,细胞的增殖和迁移都受到了抑制。同时,实验组细胞NF-κB p65核内表达降低,IκBα磷酸化水平下降,Cyclin D1表达水平下降(P<0.05)。结论PHF5A在胃癌肿瘤细胞中的表达显示高于正常细胞,可能作为癌基因通过激活NF-κB信号通路参与了胃癌细胞MGC803的增殖和迁移。
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