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近年来,男性生殖健康状况并不乐观,已成为生殖健康领域和医学研究领域中的重大课题之一。男性精子数量异常是造成男性不育的常见病因之一,少弱精子症和无精子症是一种较常见的男性不育的病症,使男性配偶的怀孕率明显降低,甚至不孕。目前,随着医疗技术水平的提高,大多数医院已将遗传因素纳入了男性不育的常规检测,核型检测就是众多遗传检测的一种。但与男性精子发生过程相关的基因就约有2000多个,筛选更多的不育致病基因,不仅对揭示男性不育基因水平上的致病机理有很大帮助,为男性不育的诊治提供一定的启示,而且能对生殖之前的遗传检测提供一定的科学依据。随着人类基因组计划的完成,单核苷酸多态性SNP与疾病易感性关系的研究成为当前一个热点。越来越多的科研学者寻找与多种疾病包括先天性疾病、慢性病、单基因及多基因疾病等相关的SNP作为一种遗传标记,进行病因研究。同样它也是近年来鉴定与男性不育相关的致病基因的常用手段。MTHFR、MTRR、MS、MAT2A、DHFR等是一碳单位代谢过程的关键酶,影响核苷酸生物合成及甲基化反应之间的平衡。有研究表明,精液中存在叶酸的高亲和力结合蛋白,这些研究提示:叶酸可能在男性生精过程中发挥重要作用,叶酸在一碳单位代谢过程中同样发挥着重要的作用,不仅在核苷酸合成的过程中扮演着重要的角色,同时也是同型半胱氨酸转化为甲硫氨酸时再甲基化过程中不可缺少的物质,以上途径中断会影响DNA合成和染色体甲基化,导致营养缺乏和疾病发生。本课题将针对几种一碳单位代谢相关基因单核苷酸多态性和mRNA的表达情况与无精子症和少弱精子症相关性进行研究,为研究少弱精子症和无精子症的发病机理和少弱精子症和无精子症诊断治疗提供一定的科学依据。经过筛选,选取MTHFR、MTRR、MAT2A和MS基因常见的SNP位点,通过基因分型进行与无精子症的相关性研究。通过化学发光免疫分析法分析无精子症患者和正常已育男性的血样中血清总同型半胱氨酸水平和叶酸水平,同时检测无精子症患者和正常已育男性精子总数及精子活力。通过RT-PCR检测几种一碳单位代谢相关基因(MTHFR、MAT2A、MTRR、MS、DHFR)的mRNA表达与少弱精子症的关系。实验结果显示,MTHFR基因的rs1801131、rs1801133和MAT2A基因的rs1078004、rs2043675位点与东北地区男性无精子症可能具有相关性。此外,无精子症患者总同型半胱氨酸水平的变化区间11.31±1.75μM/l,叶酸水平变化区间5.58±2.31 ng/ml,都在正常范围内。对照组中精子个数为83.87±34.22×10~6/ml,精子活动力为66.51±19.26%,无精子症患者精液中精子个数和精子活动力为0。RT-PCR结果表明,与对照组相比,上述基因在病例组中均出现低表达的情况,且具有统计学意义(P<0.05),本研究得出MTHFR、MAT2A、MTRR、MS和DHFR基因可能与少弱精子症和无精子症具有相关性,尚需扩大样本量进行验证。通过对东北地区男性少弱精子症和无精子症致病候选基因的筛选研究,为揭示男性不育的发病机理和疾病的诊断治疗提供一定的科学依据。