目的：本研究主要探讨DNA甲基化抑制剂地西他滨(5-aza-2 deoxycytidine DAC)对体外培养的人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞P16基因甲基化状态及mRNA和蛋白表达水平的影响,探讨其抗肿瘤作用及其可能机理。方法：实验将体外培养的处于对数生长期的人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞分为0、1、2、3四组。1、2、3三组样本采用三个梯度浓度的DAC(1×10-7mol/L、1×100-6mol/L、1×10-5mol/L) DMEM培养液进行处理,取不含DAC的等量培养液处理的0组作为对照组。细胞培养至48小时后,使用荧光甲基化特异聚合酶链反应Q-MSP技术检测实验组和对照组SCC-9细胞中P16基因甲基化状态；实时荧光定量PCR技术检测SCC-9细胞P16基因mRNA的表达水平；应用免疫组化SP法检测SCC-9细胞P16的蛋白表达。结果：用不同浓度的DAC作用于SCC-9细胞处理48h后,Q-MSP检测结果显示实验组和对照组中SCC-9细胞P16基因甲基化与非甲基化呈杂合状态。用实时荧光定量PCR检测四组P16基因的表达情况,结果显示,实验组中SCC-9细胞P16基因mRNA的相对表达量均高于对照组(2-△△cr>1),差异有统计学差异(P<0.05)。免疫组化结果显示经DAC处理过后,P16蛋白较对照组呈现高表达状态,空白对照组未见有蛋白表达。结论：1、DAC可能具有逆转人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞P16基因甲基化作用；2、DAC可能通过其去甲基化作用促使因高甲基化而失活的P16基因mRNR和蛋白恢复表达；3、DAC可作为一种基因药物治疗舌鳞状细胞癌；