松仁红衣多酚的提取纯化及抗氧化活性的研究

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本文以红松松仁红衣为原料,研究其中的多酚类物质。首先优化了松仁红衣多酚提取工艺,确定了分离纯化的条件,其后采用高效液相色谱法初步鉴定了松仁红衣多酚的组成成分,并通过体外抗氧化活性实验,研究了松仁红衣多酚抗氧化活性,最后开发研制了松仁红衣多酚口服液。研究了乙醇溶液提取法、微波辅助乙醇溶液提取法和超声波辅助乙醇溶液提取法的各个工艺条件,以松仁红衣多酚得率为评价指标,选择并优化了松仁红衣多酚类化合物的最优提取工艺。结果表明乙醇溶液提取松仁红衣多酚的最佳工艺为:乙醇浓度62%,固液比1:25(g/mL),提取时间150min,提取温度65℃,在此工艺下测得的松仁红衣多酚得率为14.642mg/g。微波辅助乙醇溶液提取松仁红衣多酚物质的最佳工艺条件为:将松仁红衣粉末与浓度为62%的乙醇溶剂以1:25混合,于350W的微波功率下微波处理3.5mmin,然后65℃水浴提取90min,在此提取工艺下松仁红衣多酚的得率为17.128mg/g。超声波辅助乙醇溶液提取松仁红衣多酚物质的最佳提取工艺为:乙醇浓度62%,固液比1:25,300W的超声功率、70℃下提取90min,在此提取工艺下松仁红衣多酚的得率为23.562mg/g。将三种方法比较,根据松仁红衣多酚的得率及时间成本等综合分析,最终选择超声波辅助乙醇溶液提取法为松仁红衣多酚的最佳提取方法。以松仁红衣多酚物质粗提液为原料,AB-8大孔树脂为分离介质,松仁红衣多酚的吸附率和解吸率为指标,分别研究树脂静态吸附-解吸试验和动态吸附-解吸试验的分离纯化条件。实验还通过高效液相色谱法初步鉴定了松仁红衣多酚的成分。结果表明松仁红衣多酚最佳纯化工艺为:上样浓度2.0mg/mL,上样流速1.OmL/min;解吸剂为浓度80%的乙醇溶液,解吸流速为0.75mL/min;试验测定松仁红衣多酚的纯度为71.21%。经过高效液相色谱的初步鉴定,松仁红衣多酚类物质的成分包括3,4-二羟基苯甲醛、香草酸、对-香豆酸、阿魏酸、肉桂酸肉桂酯及儿茶素。通过体外抗氧化活性实验研究了松仁红衣多酚的抗氧化能力,并研制了松仁红衣多酚口服液。体外抗氧化活性实验结果表明,松仁红衣多酚具有一定的抗氧化活性,其清除羟自由基、DPPH自由基及过氧化氢的EC50值分别为0.458mg/mL、0.0142mg/mL1.186mg/mL。松仁红衣多酚口服液每小支容量10mL,每日一支,其中多酚(纯度70%)添加量0.6%,白砂糖6%,蜂蜜6.5%,柠檬酸0.07%,维生素C0.05%。
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