DNA-PKcs、p53与宫颈癌放疗敏感性及预后的关系

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目的:研究放射损伤识别与修复蛋白——DNA依赖性蛋白激酶催化亚基(DNA-depended protein kinase catalytic subunitit, DNA-PKcs)以及p53在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌组织放疗反应的关系,判断DNA-PKcs、p53可否作为宫颈癌放疗敏感性的预测指标;分析p53与DNA-PKcs的表达有无相关性;研究p53、DNA-PKcs与宫颈癌患者生存的关系,分析其可否作为宫颈癌的预后指标。方法:从辽宁省肿瘤医院妇瘤科数据库中调取ⅠB -ⅡB期宫颈癌病例63例,均经病理确诊,接受相同的治疗:术前Ir192阴道双球后装腔内放射治疗,A点剂量DT1400cGy/2次,每周一次,14天后行全子宫切除加盆腔淋巴结清扫术。根据术后病理放疗反应(参照日本潼氏标准)分为放疗敏感(32例)与放射抗拒两组(31例)。调取入组宫颈癌患者放疗前活检钳取组织经10%甲醛固定石蜡包埋蜡块,4um厚连续切片,采用免疫组织化学S-P法染色,检测DNA-PKcs、p53蛋白在宫颈癌组织中的表达,根据表达阳性率以及染色浓度评估表达水平:光学显微镜下每例标本数5个有代表性的视野,每个视野数100个肿瘤细胞,计录5个视野阳性细胞数,取均值用于统计中位数并分级:不着色为0,核着色但阳性率小于或等于中位数为1+,大于中位数为2+;细胞核染色浓度分级:不着色或微染为0,淡染为1+,浓染为2+。阳性率分级加染色浓度分级为3+或4+,定为高表达;0或1+或2+定为低表达。分析放疗敏感与放射抗拒两组中DNA-PKcs、p53的表达有无差异,推断DNA-PKcs、p53在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌放疗敏感性的关系,分析DNA-PKcs与p53的表达有无相关性,以及DNA-PKcs、p53的表达水平与宫颈癌患者生存期的关系。统计学方法:采用SPSS10.0统计学软件包(α=0.05):宫颈癌DNA-PKcs表达、p53的表达与宫颈癌病理放疗反应之间的关系分别使用Pearsonχ2检验;DNA-PKcs与p53的关系使用Spearman相关分析;DNA-PKcs、p53的表达与生存期之间的关系分别采用Kaplan–Meier生存分析,Log-rank检验。结果:DNA-PKcs在正常宫颈鳞状上皮以及未受侵的腺上皮不表达,而所有肿瘤浸润组织中均可检测到, DNA-PKcs在癌细胞核中的阳性表达率10%-100%,中位数70%,均数66.67%(标准误2.94%),95%置信区间60.78%-72.55%,DNA-PKcs高表达组30例放射抗拒,7例放射敏感,而DNA-PKcs低表达组1例放射抗拒,25例放射敏感,χ2 =36.444,P <0.001(双侧)。DNA-PKcs高表达组与低表达组生存时间均数分别为51月、59月。p53在63例中40例不表达,23例阳性表达者均为浓染,癌细胞核中的表达率0-35%,中位数0,均数8.49%(标准误1.57%),95%置信区间5.34%-11.64%。p53高表达组16例放射抗拒,6例放射敏感,而p53低表达组15例放射抗拒,26例放射敏感,χ2 =7.483,P =0.006(双侧),p53高表达组与低表达组生存时间均数分别为57月、54月。DNA-PKcs与p53的表达Spearman相关分析,r =0.276,P=0.029(双侧)。结论:p53、DNA-PKcs可以作为早期宫颈癌放疗敏感性的预测指标,DNA-PKcs高表达组比低表达组显示明显的放射抗拒;p53高表达组亦比低表达组显示明显的放射抗拒;DNA-PKcs与p53的表达呈正相关;DNA-PKcs表达水平对早期宫颈癌的预后有影响,DNA-PKcs低表达者,放疗敏感,有显著的生存优势,DNA-PKcs高表达者,放疗抗拒,预后较差。
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